蛋白质和氨基酸的测定.pptVIP

蒸馏至吸收液中所加的混合指示剂变为绿色开始计时 继续蒸馏10分钟后，将冷凝管尖端提离液面再蒸馏1min 用蒸馏水冲洗冷凝管尖端后停止蒸馏。 当前31页，共76页，星期一。 第三十一页，共七十六页。 三、自动凯氏定氮法 1、? 原理及适用范围 同常量凯氏定氮法 2、? 主要仪器 自动凯氏定氮仪 消化装置 3、? 试剂 硫酸铜和硫酸钾制成片剂 当前32页，共76页，星期一。 第三十二页，共七十六页。 全自动凯氏定氮仪 当前33页，共76页，星期一。 第三十三页，共七十六页。 第三节??? 蛋白质的快速测定法 双缩脲法 紫外分光光度法 染料结合法 水杨酸比色法 当前34页，共76页，星期一。 第三十四页，共七十六页。 一、双缩脲法 1、原理 当脲小心地加热至150～160℃时，可由两个分子间脱去一个氨分子而生成二缩脲（也叫双缩脲），反应式如下： 当前35页，共76页，星期一。 第三十五页，共七十六页。 双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色的配合物，此反应称为双缩脲反应 当前36页，共76页，星期一。 第三十六页，共七十六页。 蛋白质分子含有肽键, 与双缩脲结构相似，故也能呈现此反应而生成紫红色配合物 在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比，据此可用吸收光度法来测定蛋白质含量，该配合物的最大吸收波长为560nm。 当前3