培养基模拟灌装试验.pptVIP

方案的执行与记录（2/2） 环境监测的数据 参与培养基灌封的人员 培养基灵敏度检查的结果 有无阳性结果。如有，要给出微生物鉴定的结果。 如发生异常情况，需给出调查报告。 * 培养基灌封实验的总结报告 最终报告中应包括以下内容 ??模拟的最差条件 ??事件表 ??环境监测报告 ??微生物鉴别结果 ??培养基的营养检查实验结果 ??培养条件、结果读取日、结果读取人、每位参与者的灌装瓶数等信息。 ??结论（结果是否可以接受） ??合格证书 ??工艺验证/再验证合格证书 ??人员资格确认证书 * 结论 即使一个公司培养基灌装试验是阴性的，也不能完全说明所有产品都没有被污染，因为培养基灌装试验要求的频率太小，没有统计意义。 一个可靠的培养基灌装试验对于工艺验证是十分必要的步骤。 必须实施全面质量保证（HVAC确认、清洗程序、卫生管理、个人培训……)，培养基灌装试验只是其中的一部分。 * 参考资料 FDA CGMP 无菌工艺药品指南（2004年版） EU GMP 附件1 无菌药品的生产（2008年2月新版） 新版GMP规范 附录1无菌药品 PDA Technicial Report No.22 无菌灌装产品的工艺模拟实验 WHO GMP 指南 – 技术报告 series n. 937 PIC/S Recommendations PI 007-5 PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology Technical Report No. 28 * Thank you! * 培养基灌装方案 需要考虑的关键因素 : 起始步骤 试验的次数和频率 培养基及培养条件 灌装数量 容器体积 灌装体积 灌装速度 * 培养基灌装方案 灌装过程的持续时间 人员和工作班次 环境监测措施 干预措施 容器的检查 培养方法 可接受标准 污染调查 * 关键因素一:起始步骤 新版GMP第四十八条：。。。应尽可能模拟常规的无菌生产工艺，并包括所有对结果有影响的关键生产工序。。。 1、从配制开始：冻干制剂从液体配料开始，需要更多量的培养基，考察的最全面。（如工艺要求配好的液体需要在配制罐中蒸汽灭菌的应从配制开始） 2、从除菌过滤前开始：考察的内容包括除菌过滤系统，考察较全面，培养基不需要灭菌，需要考虑生物负荷。 3、从除菌过滤后面开始：只考察灌封等操作过程，培养基需要事先灭菌。 * 关键因素二: 试验的次数和频率 培养基模拟试验的初始验证，至少需要成功的连续进行 3 次独立的模拟试验（建议在不同的工作日进行试验）。 首次验证后，培养基模拟试验通常每年进行2次，每次进行1批即可。 当生产线发生变更，并且经过评估可能对无菌生产工艺有潜在危险时，应当进行额外的培养基灌装试验。 * 关键因素三: 培养基及培养条件 (1/3) 培养基必须适应广谱微生物的生长，包括需氧菌、酵母菌和霉菌（非选择性培养基）。 较好的澄明度，较小的粘度，易于除菌过滤。 推荐使用大豆消化酪素琼脂培养基(SCD) ，以及大豆胰蛋白胨肉汤(TSB)。 如果产品在缺氧条件、通常在氮气保护下灌装时，或在环境中分离出厌氧菌时，可能需要使用厌氧培养基:液体硫乙醇酸盐培养基(FTM)。 * 关键因素三: 培养基及培养条件 (2/3) 培养基必须做促生长试验，按药典方法（10版药典新规定）进行评价。有条件的推荐使用1~2种最常见的环境分离菌。 促生长试验可以同步或14天培养后进行。用于促生长试验的培养基培养前需经过同样的工艺步骤（例如清洗、灭菌、充氮、灌装、冻干等） 通常情况，在培养结束后，一些玻璃瓶（从生产开始、中间、结束时取样）进行微生物接种。 * 关键因素三: 培养基及培养条件 (3/3) 培养温度 全部样品应在20-35℃(±2.5℃)下培养14天。通常在 20-25℃下 培养 7 天，然后在30-35℃下培养 7 天；或者在30-35℃培养 7 天后，再转移到 20-25℃培养 7 天。 原则：选择的温度适宜那些从环境中分离的微生物或生