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* （二） 真核生物DNA复制 真核生物与原核生物DNA复制相似，复制速度慢，冈崎片段短，有核小体的解聚和形成 第94页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 　滚环复制 第62页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 　D环复制 第63页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 3?-OH 5?-P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 5 滚环复制 5 ?? 5? 3? 3? 5? 第64页，共133页，编辑于2022年，星期一 * dNTP DNA-pol γ D环复制(D-loop replication) 是线粒体DNA (mitochondrial DNA，mtDNA)的复制形式。 第65页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 一、 原核生物DNA复制的特点 参与DNA复制的物质 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶 模板(template) : 解开成单链的DNA母链 引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP可以依 次聚合 其他的酶和蛋白质因子 第四节 原核生物和真核生物DNA复制特点 第66页，共133页，编辑于2022年，星期一 * （一） 参与DNA复制的主要酶类 解旋、解链酶类 　　 DNA解链酶 DNA拓扑异构酶 　　单链DNA结合蛋白（SSB） 引物酶 DNA聚合酶 (DNA pol ) DNA连接酶 第67页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 1.解旋、解链酶类 DNA分子的碱基埋在双螺旋内部，只有把DNA解成单链，它才能起模板作用。 多种酶和辅助蛋白质因子的协同作用，共同解开、理顺DNA双链，并维持DNA分子在一段时间内处于单链状态。 第68页，共133页，编辑于2022年，星期一 * DNA解链酶（DNA helicase） 复制前，需要解链酶在ori部位解开双链碱基对之间的氢键形成两股单链， 解链过程需要DnaA、 DnaB、DnaC等多种解链蛋白参与。 解链酶即为DnaB蛋白。 第69页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 10 8 局部解链后 复制过程正超螺旋的形成： 第70页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 第71页，共133页，编辑于2022年，星期一 * DNA拓扑异构酶（DNA topoisomerase） 拓扑异构酶作用特点： 　　　既能水解 、又能连接磷酸二酯键 分类： 　　　　拓扑异构酶Ⅰ 　　　　拓扑异构酶Ⅱ 第72页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 作用机制 ： 拓扑异构酶Ⅰ 　　　切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。反应不需ATP。 拓扑异构酶Ⅱ 　　　切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。 第73页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 单链DNA结合蛋白（single stranded DNA  binding protein, SSB） 在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整 在复制中SSB不是沿着复制方向移动，而是不断脱离，又不断与新解开的单链结合。 第74页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 2.引物酶（primase） 复制起始时催化生成RNA引物的酶 引物酶由dnaG基因编码，故引物酶又称DnaG蛋白。 在 DnaB 、DnaC 等蛋白因子参与下辨认并结合于复制起始点上，进而结合引物酶形成引发体（primosome）。 第75页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 3.DNA聚合酶 (DNA polymerase,DNA pol ) 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase DDDP) 简称：DNA-pol 活性： 1. 5??3? 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性： 3? ? 5?外切酶活性 5? ? 3?外切酶活性 第76页，共133页，编辑于2022年，星期一 * 原核生物的DNA聚合酶 DNA-pol Ⅰ DNA-pol Ⅱ DNA-pol Ⅲ 第77页，共133页，编辑于2022年，星期一