第5讲-染色体与DNA(4).ppt

2.4 原核生物和真核生物DNA的复制特点;2.4.1 原核生物DNA的复制特点;大肠杆菌DNA复制起始点（OriC）保守序列分布图;OriCin E.colichromosomal DNA;2.4.1.1 DNA双螺旋的解旋;由大肠杆菌oriC复制起始点处引发的DNA复制过程;(1)单链结合蛋白（SSB蛋白）;(2)DNA解链酶（DNA helicase）;Replication of SV40 DNA;精选ppt;精选ppt;2. 4. 1. 3 复制的引发和终止;精选ppt;滞后链的引发过程由引发体（primosome）来完成。引发体由6种蛋白质n、n’、n’’、Dna B、C和I共同组成，只有当引发前体（preprimosome）把??6种蛋白质合在一起并与引发酶（primase）进一步组装后形成引发体，才能发挥其功能。 引发体在滞后链分叉的方向上前进，并在模板上间断性引发生成滞后链引物---RNA短链，再由DNA聚合酶III作用合成DNA，直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。由RNase H降解RNA引物并由DNA聚合酶I将缺口补齐，再由DNA连接酶将两个冈崎片段连在一起形成大分子DNA。 ;精选ppt;链的终止需要Tus蛋白参与;链的终止（Termination）;精选ppt;2.4.1.4 DNA聚合酶;表2-10 大肠杆菌DNA聚合酶I、II和III的性质比较;精选ppt;DNA聚合酶的共同点：;DNA聚合酶II的活性很低，若以每分钟酶促核苷酸掺入DNA的转化率计算，只有DNA聚合酶I的5%，所以也不是复制中主要的酶。目前认为DNA聚合酶II的生理功能主要是起修复DNA的作用。 DNA聚合酶III包含有7种不同的亚单位和9个亚基，其生物活性形式为二聚体。它的聚合活性较强，为DNA聚合酶I的15倍，聚合酶II的300倍。它能在引物的3’—OH上以每分钟约5万个核苷酸的速率延长新生的DNA链，是大肠杆菌DNA复制中链延长反应的主导聚合酶。 ;2.4.2 真核生物DNA的复制特点;真核生物DNA的复制子被称为ARS（autonomouslyreplicating sequences），长约150bp左右，包括数个复制起始必需的保守区。真核生物DNA复制叉的移动速度大约只有50bp/秒。因此，人类DNA中每隔30,000-300,000bp就有一个复制起始位点。;真核细胞中有5种DNA聚合酶，分别称为DNA聚合酶α、β、γ、δ和ε。;DNA聚合酶的主要作用： DNA聚合酶α主要参与引物合成。 DNA聚合酶β活性水平稳定，主要在DNA损伤的修复中起作用。 DNA聚合酶δ是主要负责DNA复制的酶。 DNA聚合酶ε的主要功能可能是在去掉RNA引物后把缺口补全。 ;The mechanism of telomere extension by telomerase Reverse ;2. 4. 3 DNA复制的调控（了解）;ColEl质粒DNA的复制调控;ColE1质粒DNA复制起始部位调控因子之间关系;大肠杆菌染色体DNA的复制调控;真核细胞DNA的复制调控;课外作业