中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的综合色谱分析.ppt

色谱实验综合分析报告 第一页，共三十一页。 中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的色谱综合解析 第二页，共三十一页。 熔点：163℃～164℃ 溶解性：易溶于水，溶于乙醇，不溶于石油醚。 性状：环烯醚萜苷类化合物，对α-萘酚、羟肟酸、三氯化铁呈正反应。白色结晶。 药理作用：栀子苷具有缓泻、镇痛、利胆、抗炎、治疗软组织损伤以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用。 色泽：白色、类白色或浅黄色。 口感与气味：无味 栀子苷简介 第三页，共三十一页。 实验1 有效成分的提取及分离纯化 第四页，共三十一页。 实验1 有效成分的提取及分离纯化 实验结果表明—— 大孔树脂吸附法具有吸附范围广，吸附容量大，洗脱容易，反复使用等特点，对栀子苷吸附能力较高，其纯化产物栀子苷含量高。方法简单、可靠。 第五页，共三十一页。 1.薄层板的铺制：硅胶-CMC 板的铺制 2.溶液的配制： 实验2 有效成分的薄层色谱法鉴别 供试品： 要求：以50%甲醇为溶剂，配制为相当于原药材0.2g/mL的浓度。 方法：(1)量取粗提液2.4mL(100g药材浓缩为120mL溶液)于10mL容量瓶定容。 (2)称取有效部位粉末0.1056g(有效部位5.3014g) 于10mL容量瓶定容。 对照品： 要求：以乙醇为溶剂，配制成约4mg/mL的浓度。 以羧甲基纤维素Na为黏合剂 第六页，共三十一页。 3.薄层色谱法鉴别： 实验2 有效成分的薄层色谱法鉴别 第七页，共三十一页。 1.色谱条件： 实验3 HPLC测定栀子药材及提取物中栀子苷含量 项目 条件 色谱柱 ODS(150mm×4.6mm，5μm) 流动相 乙腈-1%醋酸水溶液(15:58，V/V) 流动相流速 1mL/min 检测波长 238nm 柱温 室温 进样量 20μL 第八页，共三十一页。 实验3 HPLC测定栀子药材及提取物中栀子苷含量 第九页，共三十一页。 2.实验步骤 实验3 HPLC测定栀子药材及提取物中栀子苷含量 第十页，共三十一页。 (1)溶液配制： 实验3 HPLC测定栀子药材及提取物中栀子苷含量 供试品： 要求：以流动相为溶剂，配制为相当于原药材2mg/mL的浓度。 方法：(1)量取粗提液0.24mL(100g药材浓缩为120mL溶液)于10mL容量瓶定容，取1mL于10mL容量瓶定容。 (2)称取有效部位粉0.1069g(有效部位5.3014g) 于100mL容量瓶定容，取1mL于10mL容量瓶定容。 对照品： 要求：以流动相为溶剂，精密配制成约10μg/mL、20μg/mL 、40μg/mL 、60μg/mL 、80μg/mL的浓度。 第十一页，共三十一页。 (2)线性关系考察 实验3 HPLC测定栀子药材及提取物中栀子苷含量 第十二页，共三十一页。 3.结果 栀子药材中栀子苷含量为39.086mg/g， 栀子有效部位中栀子苷含量为591.733mg/g。 栀子苷得率为80.396%。 实验3 HPLC测定栀子药材及提取物中栀子苷含量 第十三页，共三十一页。 实验4 GC检查环烯醚萜类有效部位中的残留溶剂 第十四页，共三十一页。 1.色谱条件： 实验4 GC检查环烯醚萜类有效部位中的残留溶剂 项目 条件 色谱柱 SPB-1(30m×0.25mm×0.25μm)毛细管柱 载气 高纯氮(柱前压7Pa，分流比30：1) 进样量 0.5μL 柱温 进样口温度：230 ℃；程序升温(初始为50℃，恒温3min，变为40 ℃升温至230 ℃后，恒温5min) 检测器 FID检测 氢焰离子化检测器 选择性检测器 质量型检测器 第十五页，共三十一页。 2.实验步骤 实验4 GC检查环烯醚萜类有效部位中的残留溶剂 第十六页，共三十一页。 (1)溶液配制： 实验4 GC检查环烯醚萜类有效部位中的残留溶剂 内标法： 由于进样量很小(0.5μL)，导致相对误差会很大。所以以内标物为基准以比值的方式进行数据处理，可以提高准确度。 方法：量取无水乙醇0.633mL、正丁醇0.618mL，以10mL容量瓶按照1：10的比例稀释2次，再以10mL容量瓶定容。 方法：量取0.618mL正丁醇于10mL容量瓶定容，再以10mL容量瓶，以1：10的比例稀释1次，取1mL于10mL容量瓶，称取0.9846g有效部位粉末加入同一容量瓶，加入适量溶剂(不超过刻度线)，振荡使固体溶解后，定容。 第十七页，共三十一页。 (2)样品鉴定： 按照上述色谱条件进行检测，得到供试品溶液和对照品溶液的气相色谱图。 实验4 GC检查环烯醚萜类有效部位中的残