《生物制药工艺学》课件第三章 基因工程药物-2.pptVIP

4.非贴壁依赖性细胞 概念：anchoraged-independent cell不依赖于固体支持物表面生长的细胞，可在培养液中悬浮生长，被称为悬浮细胞。 举例：血液、淋巴细胞、肿瘤细胞和某些转化细胞，Namalwa细胞。 5.兼性贴壁依赖性细胞 概念：对支持物的依赖性不严格，既可贴壁生长，也可悬浮生长。 举例：CHO细胞、BHK细胞、L929细胞。 理想的药物生产细胞系 4.4.2 动物细胞培养基本过程 原代细胞分离与培养 传代细胞培养 1.原代细胞培养－过程 从体内取出组织或器官 经过粉碎、消化而获得单细胞 进行体外接种培养。 37℃消化，胰蛋白酶，胶原酶 工作浓度：0.1-0.3 mg/ml 动物组织或器官 洗涤粉碎 酶解消化 离心过滤 洗涤 稀释细胞 接种培养 2.传代细胞培养－过程 概念：对长满表面的细胞进行消化分离，接种到新的培养基上，进行新一轮培养。 传代时期：刚刚全部汇合的细胞。 消化方法：过程与原代细胞相同。 传代的次数：不能无限次传代，保证特性 防止细胞系之间、非细胞生物的污染 要领：适宜的时期和方法，不要过度 4.4.3 动物细胞大规模培养方法 单层贴壁培养 悬浮培养 微载体培养 固定化培养 1. 单层贴壁培养——概念与过程 细胞贴附于一定的固体支持表面上，形成单层细胞的培养过程。 生长过程： 接种，细胞经过吸附、接触而贴附于基质表面； 进行生长、分裂繁殖，很