《生物制药工艺学》课件第三章 基因工程制药-1.pptVIP

(4)阳离子交换层析与浓缩 用0.1M醋酸缓冲液（pH 5.0）平衡树脂。 上样，相同缓冲液冲洗。 盐浓度线性梯度5～50 ms/cm进行洗脱 配合SDS收集干扰素峰。 浓缩：10 ku超滤膜进行。 (5)凝胶过滤层析 洗涤液：0.15 M NaCl的0.01M磷酸缓冲液（pH7.0）清洗系统和树脂 上样，相同缓冲液进行洗脱。 合并干扰素部分 (6)无菌过滤分装 0.22 μm滤膜过滤干扰素溶液 分装 -20℃以下的冰箱中保存。 (7)检测项目 干扰素鉴别试验 干扰素效价测定 蛋白质含量，纯度测定，分子量 宿主残余蛋白、残余DNA 干扰素结构鉴定：紫外光谱，肽谱，N端序列 其它：热原，内毒素，残留抗生素 思考题（2） 1、干扰素纯化工艺的原理是什么？ 2、干扰素纯化工艺过程中各工段的目的是什么？ 3、根据干扰素的理化和生物学特性，设计纯化工艺路线？ 1、干扰素的种类 概念：（interferon，IFN） 机体受到病毒感染时，免疫细胞产生的一组结构类似、功能接近的细胞因子 功能：干扰病毒在细胞内的繁殖 分类： Ⅰ型：有IFN-α和IFN-β，其中IFN-α有二十余个亚型，IFN-β仅有一个亚型。Ⅰ型干扰素具有抑制病毒复制、抗寄生虫、抑制多种细胞增殖、刺激免疫细胞的杀伤活性、参与免疫调节、抗肿瘤等作用。 Ⅱ型：只有IFN-γ，且只有一种亚型，除具有抗病毒、抗增殖活性外，其主