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葡聚糖试验(G-test)--深部念珠菌和曲霉感染诊断β葡聚糖广泛分布于多种真菌胞壁中,是真菌的特有成分。其中(1—3)—β—D—葡聚糖占真菌胞壁成分50% 以上,尤以酵母样真菌中含量为高。系统性真菌感染时真菌经吞噬细胞吞噬处理后,(1—3)—β—D—葡聚糖持续释放,使其在血液及其他体液中含量增高。浅部真菌感染则无类似现象。因此,因此测定血液、BAL液中的葡聚糖可作为诊断真菌感染的一种方法。 * 精品课件资料 这种方法具有早期、快速、及适用范围广的优势,目前主要用于深部念珠菌和曲霉感染的诊断、高危人群的监测以及疗效、预后的评价。 * 精品课件资料 葡聚糖试验G---test:局限性 由于隐球菌具有较厚的荚膜,(1—3)—β—D—葡聚糖含量也少,故该成分不能作为隐球菌感染指标。 但由于其不能将真菌分类,故不适于流行病学研究。 * 精品课件资料 细菌耐药性检查 * 精品课件资料 细菌耐药的主要机制 细菌耐药最主要的机制: 产生β–内酰胺酶,约占80%。 其他耐药机制包括: 细胞膜通透性改变: 如绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药为D2通道缺失 细胞靶部位改变: 如MRSA就是PBP2变为PBP2’,使金葡菌耐甲氧西林。 细菌泵出机制的建立: 如绿脓杆菌、不动杆菌对亚胺培南耐药。 细菌缺乏自溶酶 * 精品课件资料 灭活酶的产生 ?-内酰胺酶: 最主要的灭活酶(已发现近300种) 氨基糖甙类钝化酶: 包括磷酸转移酶、乙酰转移酶和核苷转移酶 氯霉素乙酰转移酶 其它:磷霉素 红霉素 林可霉素、克林霉素 * 精品课件资料 1、ESBLs的特点 由细菌质粒介导:由破坏氨苄西林和一代头孢菌素的简单的?-内酰胺酶突变而来(在TEM-1、TEM-2 和 SHV-1基本结构基础上有1~4个氨基酸突变而致) ; 可以被β –内酰酶抑制剂所抑制; 能水解氧亚氨基β –内酰胺(Oxyimino β-lactam)抗生素 (他啶、曲松、噻肟、氨曲南,包括四代:匹罗、吡肟); 主要由肺炎克雷伯、大肠杆菌产生,也可由其他肠杆菌科 细菌,不动杆菌以及铜绿假单胞菌产生; ESBLs通常与氨基糖苷类、喹诺酮类、氯霉素、SMZ-TMP 耐药相伴随。 * 精品课件资料 易产AmpC酶的细菌 肠杆菌属 (阴沟肠杆菌) (产气肠杆菌) 弗劳地枸橼酸杆菌 粘质沙雷菌 绿脓杆菌 变形杆菌 摩根摩根菌 普罗威登斯菌 易产ESBL的细菌 大肠杆菌 肺炎克雷伯菌 产酸克雷伯菌 其他肠杆菌科菌 2、易产AmpC酶与ESBL的细菌 * 精品课件资料 2008-6-26 临床医生如何区分ESBL和AmpC酶 从常规药敏报告中判定 高产AmpC酶 ESBL 三代头孢 耐药 耐药/中敏/敏感 头霉菌素 耐药 敏感 含酶抑制剂 耐药 敏感 头孢吡肟 敏感 耐药/中敏/敏感 碳青霉烯类 敏感 敏感 常用药物敏感试验 三种:K-B纸片法;稀释法;E试验法。 ① K-B(Kirby-Bauer)纸片琼脂扩散法:最常用。 原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈,抑菌圈大小与该药对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系。 * 精品课件资料 结果判读 敏感(susceptible) 表示待检菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。 中度敏感(intermediate) 指待检菌可被测定药物大剂量给药后在体内能达到的浓度所抑制,或在测定药物浓集部位的体液中,如尿中被抑制。 耐药(resistant) 表示待检菌不能被体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制。 * 精品课件资料 K-B纸片琼脂扩散法 * 精品课件资料 * 精品课件资料 常用药物敏感试验 ② 稀释法 是定量测定抗菌药物抑制细菌生长的体外方法,以测得某抗菌药物能抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度即最小抑菌浓度。试验的结果以minimal inhibitory concentration, MIC(ug/ml)数值
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