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红细胞血型检测 * 四、交叉配血试验 （一）要求和内容 交叉配血的要求： 主侧配血要求： 绝对不可以有凝集或溶血现象。 次测配血要求： 供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。 凝集 不凝集 第28页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 四、交叉配血试验 交叉配血试验的内容 患者 献血者 主侧 次侧 主侧配血 用患者血清与供 者红细胞进行试验 次测配血 供血者血清与患 者红细胞进行试验 第29页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 四、交叉配血试验 交叉配血的目的 交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。 尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。 第30页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 四、交叉配血试验 （二）结果的解释及处理 1.抗体筛查阴性，交叉配血相容： 绝大部分标本抗体筛查阴性，交叉配血也是相容的。 2.抗体筛查阴性，主侧交叉配合试验阳性 （1）复查血型 （2）主侧凝集类B抗原 （3）血清中可能含有一种ABO抗体，必要时可以做ABO亚型鉴定 第31页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 四、交叉配血试验 3.抗体筛查试验阳性，主侧交叉配合试验阳性 （1）自身对照试验阴性：受血者体内有同种不规则抗体。 （2）自身对照试验阳性：受血者血清内可能有自身抗体或 同时存在不规则抗体。 （三）影响因素 ①离子干扰 ②温度 ③操作不规范 ④ 离心不当 第32页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第二节 盐水介质实验技术 盐水介质试验技术常用于血型鉴定、血清中IgM类抗体的筛查和鉴定、盐水介质的交叉配血等。 基本方法 1.平板法 用于ABO血型和RhD抗原的定型 特点：简单、快速，但易污染环境。 2.试管法 为定型试验方法，也可于半定量试验。是输血 前检验最常用的试验方法。 特点：简单、快速、易学，结果准确、可靠。 3.微孔板法 为定性试验方法。 第33页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第二节 盐水介质实验技术 盐水介质配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 离心 看结果 阳性 阴性 第34页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第二节 盐水介质实验技术 第35页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第三节 酶处理实验技术 原理：在酶的作用下切断带有负电荷的羧基基团的唾液酸，降低Zeta电位，缩短红细胞之间的距离。增强IgG抗体对红细胞的凝集。 常用对的酶：菠萝酶，无花果酶，木瓜酶 第36页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第三节 酶处理实验技术 酶介质配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 主次侧 均加酶 酶 上海市血液中心血 第37页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第三节 酶处理实验技术 37℃ 水浴30分钟 ? 37 ℃ 离心 看结果 阳性 阴性 ? 第38页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第三节 酶处理实验技术 结果的判断 （1）阳性对照管凝集，阴性对照管凝集，被检管凝集为阳 性，不出现凝集判定为阴性。 （2）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，实验失 败分析原因，重新实验。 第39页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第四节抗球蛋白实验技术 一、基本原理 抗球蛋白试验（Coombs实验）主要用于检测血清中的不完全抗体如：IgG、IgA和（或）补体如：C3、C4。 在盐水介质中，不完全抗体只能致敏红细胞，而不能使红细胞出现可见的凝集反应，加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子的Fab片段与红细胞表面的受体结合，而产生红细胞凝集，因此采用此方法可以检测出血清中是否存在不完全抗体。 第40页，共74页，编辑于2022年，星期二 红细胞血型检测 * 第四节抗球蛋白实验技术 抗球蛋白试验原理图 第41页，共74页，编辑于2