维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较.pdf

。 维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较 目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2 ， 6-二氯靛酚滴定法、2 ，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分 析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果. 为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以维生素 C 或抗坏血酸和测定为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中 的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素 C含量测定的文 献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析. 结果核心期刊载刊文献占文献总量的 45.06％,其中光度法占 65.69％,电化法占 18.63％,色谱法占 12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的 45.06％,其中光度 法占 60.92％,色谱法占 19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量 测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是 HPLC法上升趋势尤为明显. 一．荧光法 1 ．原理 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA） 反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度 在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 -可编辑修改- 。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与 OPDA 反应，以此排除样品中荧光杂 质所产生的干扰。本方法的最小检出限为 0.022 g/ml。 2 ．适用范围 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3. 注意事项 3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测 定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生 C。 3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上 清液过滤。 3.3 活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用， 故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用 2g 活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明 显。 二、2 ，6-二氯靛酚滴定法（还原型 VC ） -可编辑修改- 。 1、原理： 还原型抗坏血酸还原染料2 ，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红 色消失。还原型抗坏血酸还原2 ，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。 在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2 ，6-二氯靛酚的量与样品中 所含维生素 C 的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常 用2 ，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。 2、注意事项 ⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水； ⑵ 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考； ⑶ 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的 2%草酸液中，以防氧化，损失维生 素C ； ⑷ 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸 代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2 ，6-二氯靛酚，使测定数字 增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生； -可编辑修改- 。 ⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化； ⑹ 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除； ⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。 3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。 缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还 原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在 酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6 —DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱 性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用 2,6—DICP滴定含 有抗坏血酸的酸性