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精心整理 茶多酚的含量测定 高锰酸钾直接滴定法 目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作 原理 茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗 1mL0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。 仪器与试剂 仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL 白瓷皿。 试剂： 1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL， 如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL， 过滤后贮于棕色瓶中。 2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。 3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。准确吸取0.630% 草酸溶液 10mL，放入250ml锥形瓶中（平行 3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为 1.84 的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。开始慢滴， 待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终 点。计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。 测定步骤 1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在 沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定 容至 100mL，摇匀。2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液 5mL，再加入 供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜， 接近终点时应慢滴。直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。同时做空 白测定。 五、结果计算 式中：X—茶多酚的含量，%，B—空白消耗的高锰酸钾毫升数，mLA—样品消耗的高锰酸钾毫升 数，mLω--高锰酸钾的浓度，%，m—样品的质量g，V1—测定用供测试液的体积，mL，V2--供测 试液的体积，mL 酒石酸铁比色法 原理： 茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的 20％～35％，由约30种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。 精心整理 精心整理 按其化学结构分为四类：（1）儿茶素类，属黄烷醇类；（2）黄酮及黄酮醇类；（3）花白素及花青素， 即羟基- ［4］-黄烷醇及其钾盐；（4）醋酸及缩酚酸类。其中以黄烷醇类化合物最重要（占多酚的 80％左右）。纯儿茶素一般为白色无定形粉末，在空气中极易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲 醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。茶多酚能溶于水、乙醇、 甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120℃并保持30min， 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。 酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正 比。因此可以用比色方法测定。该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。 茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法，由于高锰酸钾直接滴定法操作比较复 杂，且靠肉眼观察颜色判断终点，如果样品溶液颜色较深时，可能影响测定结果。本实验将应用酒 石酸铁比色法测定茶多酚的含量。 仪器与试剂 仪器：分光光度计 试剂：（1）酒石酸铁溶液：称取FeSO4 ·7H2O1.000g，含4个结晶水的酒石酸钾钠 5.000g，加蒸 馏水溶解后，用蒸馏水稀释至 1000mL （2）pH7.5 的磷酸缓冲液： 60.2gNa2HPO4 ·12H2O， 5.00gNaH2PO4·2H2O，加蒸馏水溶解后．用蒸馏水稀释至1000mL． 步骤 （l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品1g于200mL三角烧瓶中，加入沸水80mL，在 沸水浴中浸提 30min，然后过滤、洗涤，滤液倒人 100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定 容至刻度，摇匀，备用。 摇匀，再加入pH7.5磷酸缓冲液稀释至刻度。以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白。选择 540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度。 计算 式中：ω—茶多酚的含