抗肿瘤药物研发和临床治疗研究中斑马鱼移植瘤模型的应用.docVIP

抗肿瘤药物研发和临床治疗研究中斑马鱼移植瘤模型的应用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：抗肿瘤药物研发和临床治疗研究中斑马鱼移植瘤模型的应用 1 1、斑马鱼模型的优势与局限性 2 2、斑马鱼移植瘤模型的构建和类型 3 3、斑马鱼移植瘤模型在抗肿瘤药物中的应用 5 4、展望 7 文2：自然灾害研究中遥感与地理信息系统的应用 8 1 遥感与地理信息系统相关内容概述 8 2 自然灾害研究中遙感与地理信息系统应用存在的主要问题 9 3 自然灾害研究中遥感与地理信息系统的具体应用探究 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 抗肿瘤药物研发和临床治疗研究中斑马鱼移植瘤模型的应用 文1：抗肿瘤药物研发和临床治疗研究中斑马鱼移植瘤模型的应用 人类肿瘤的动物异种移植模型是肿瘤研究的关键临床前工具。目前最常用的动物移植瘤模型是免疫缺陷小鼠模型。近十年来，由于斑马鱼（Daniorerio）与人类基因组同源性高达70%，个体小，可大规模快速繁殖，胚体透明易于观察，发育前一个月无适应性免疫，以及成本低等原因[1，2]，这种动物模型逐渐发展成为另一种相对快速且具有较高成本效益的人类肿瘤体内研究模型。本综述中，我们讨论了使用斑马鱼模型的优势及其局限性，并与小鼠模型进行了对比；整理了目前斑马鱼移植瘤模型的构建及不同的类型；总结了该模型在抗肿瘤药物研发和临床治疗研究中的应用及其在精准医学中的应用前景。 1、斑马鱼模型的优势与局限性 生物学特性 斑马鱼在二十世纪六十年代成为发育遗传学的典范生物。由于斑马鱼体外受精、体外发育、胚体完全透明的特征，使得研究者不仅能通过记录特定细胞在胚胎发育中的分裂历史，跟踪观察每一个细胞的发育命运，同时也给遗传操作和人工诱变提供了极为有利的条件[3]。斑马鱼胚胎发育迅速，从单细胞受精卵发育至具有可辨认的脊椎动物体节、跳动的心脏和正常的神经系统，只需要1周时间[4]，因此应用于药物筛选大多在1周内即可完成。斑马鱼模型不仅使实验周期大大缩短，实验通量大为提高，而且斑马鱼在出生后1周内，胚胎只需置于培养皿中，其会消耗自身的卵黄作为营养物质，无需人工喂食或维护，只需偶尔更换培养基，极大地节约了实验空间和饲养消耗。 免疫学特性 斑马鱼的先天免疫系统至少在受精后2d(2dpost-fertilization，2dpf）时才发挥其功能，而在受精后约4～6周时其适应性免疫在形态和功能上才趋于成熟[5，6，7]。因此如果在斑马鱼早期胚胎阶段（囊胚阶段至受精后48h），即其适应性免疫应答尚未建立时，通过显微注射建立异种移植则不需要免疫抑制剂处理。所以在斑马鱼早期胚胎中进行的研究是在其不具有完全免疫能力情况下进行的。 可视化特性 斑马鱼胚体透明可实现体内细胞和亚细胞成像，使其体内药物作用效果变得可视化。而且，还可利用组织特异性表达荧光报告基因来构建转基因斑马鱼，目前已有的如标记血管[8，9]、神经元[10]、血液[11，12]、免疫细胞[13，14]等。尽管如此，斑马鱼的成像能力仅限于较早年龄的胚胎，随着年龄的增长，其胚胎变大且不透明，影响体内成像。目前已有光片成像技术，或称选择性平面照明显微镜技术（SPIM)[15，16]，允许更深的组织穿透和更小的光毒性，但还无法穿透成年斑马鱼的组织。 局限性 斑马鱼的上述生物学特性使其与脊椎动物发育而来的哺乳动物小鼠模型相比具有明显的优势，但其依然存在着一些固有的局限性。首先，虽然斑马鱼与人类基因组具有较高同源性，但其与人类蛋白质的差异不可避免地产生不同药效[17]。其次，斑马鱼胚胎总体形态在1～5dpf之间变化不大，但脉管系统和其它器官经历了广泛扩张和重塑[4，18]，此特点有助于发育研究，但在肿瘤研究中可能需要较稳定的发育过程。携带移植瘤的斑马鱼饲养于34°C，低于人体生理体温，移植瘤细胞的增殖速度不同于人类体内，而且移植瘤微环境与人类肿瘤存在差异。再者，斑马鱼主要通过直接浸泡给药，其药物渗透率以及口服摄取率较难预测。尽管已有研究表明斑马鱼体内的药物分布、代谢和排泄与人类相似，但是迄今为止几乎没有研究深入探索这些领域。此外，斑马鱼胚胎与幼鱼体积小，实验操作较难，现有针对斑马鱼蛋白质的抗体数量有限。这些优缺点的总结见表1。 表1斑马鱼和小鼠异种移植瘤模型的优缺点 2、斑马鱼移植瘤模型的构建和类型 移植瘤构建 对斑马鱼移植人类肿瘤细胞时，每次可以显微注入50～300个细胞，由于斑马鱼早期免疫功能缺失因而成瘤能力明显，还可以利用斑马鱼的成像能力进行体内的深层次观察。研究者们尝试了斑马鱼的几个注射部位用以模拟不同的癌症阶段。在斑马鱼受精卵发育至囊胚阶段，卵黄是