遗传与进化 3.1 三点测验.ppt

遗传学及实验 《 遗传学及实验》课题组 漳州师范学院生命科学与技术系 2014.03 重组值与交换值 重组值（recombination value ）：不完全连锁的双杂合体产生的重组型配子数占配子总数的百分比，又称重组率（recombination frequency），用Rf表示。 交换值（cross-over value）：指不完全连锁的两基因间发生交换的频率。 通常把重组值称为交换值，实际上交换值不能等同于重组值，因为等位基因之间偶然会发生多重交换，多重交换的结果不一定形成重组型配子，用重组值代表交换值会造成偏低的估计。 100% Rf = 重组型配子数 配子总数 基因定位和连锁遗传图 基因定位：确定基因在染色体上的位置. 基因在染色体上各有其一定的位置??确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序??基因之间的距离是用交换值表示的. 连锁遗传图 确定位于同一染色体基因的位置和距离，把它们标志出来后可以绘成连锁遗传图. 一、 连锁分析的方法 基因连锁分析的主要方法： (一)、两点测交(two-point testcross) 通过三次测交，获得三对基因两两间交换值、估计其遗传距离；每次测验两对基因间交换值；根据三个遗传距离推断三对基因间的排列次序。 (二)、三点测交(three-point testcross) 一次测交就考虑三对基因的差异，从而通过一次测验获得三对基因间的距离并确定其排列次序。 两点测交 (1) 1. 通过三次亲本间两两杂交，杂种F1与双隐性亲本测交，考察测交子代的类型与比例。 例：玉米第9染色体上三对基因间连锁分析： 子粒颜色： 有色(C)对无色(c)为显性； 饱满程度： 饱满(SH)对凹陷(sh)为显性； 淀粉粒： 非糯性(Wx)对糯性(wx)为显性. (1).(CCShSh×ccshsh)F1 × ccshsh (2).(wxwxShSh×WxWxshsh)F1 × wxwxshsh (3).(wxwxCC×WxWxcc)F1 × wxwxcc 两点测交的3个测交结果 两点测交 (2) 2. 计算三对基因两两间的交换值估计基因间的遗传距离。 两点测交 (3) 3. 根据基因间的遗传距离确定基因间的排列次序并作连锁遗传图谱。 C-Sh: 3.6 Wx-Sh: 20 Wx-C: 22 两点测交：局限性 1. 工作量大，需要作三次杂交，三次测交； 2. 不能排除双交换的影响，准确性不够高。 当两基因位点间距离较远时，两点测验的准确性就不够高。 三点测交 (1) 仍以玉米C/c、Sh/sh、Wx/wx三对基因连锁分析为例，在描述时用“+”代表各基因对应的显性基因。 1. 用三对性状差异的两个纯系作亲本进行杂交、测交： P: 凹陷、非糯性、有色× 饱满、糯性、无色 shWxC/shWxC Shwxc/Shwxc F1及测交:凹陷、非糯性、有色×饱满、糯性、无色 shWxC/Shwxc shwxc/shwxc 2. 考察测交后代的表现型、进行分类统计。 在不完全连锁的情况下测交后代有多少种表现型？ 单交换 双交换 不交换 A B C a b c A B C A B C a b c a b c A B C a b c 3. 按各类表现型的数目，对测交后代进行分组； 4. 进一步确定两种亲本类型和两种双交换类型； 三点测交(2) 测交后代的表现型 F1 配子种类 粒数 交换类别 饱满、糯性、无色 Sh wx c 2708 凹陷、非糯、有色 sh WxC 2538 饱满、非糯、无色 Sh Wx c 626 凹陷、糯性、有色 sh wx C 601 凹陷、非糯、无色 sh Wx c 113 饱满、糯性、有色 Sh wx C 116 饱满、非糯、有色 ShWxC 4 凹陷、糯性、无色 sh wx c 2 总 数 6708 亲本型 单交换 单交换 双交换 三点测交(3) 5. 确定三对基因在染色体上的排列顺序。 分别计算三对基因两两间交换值，确定基因顺序； 用两种亲本型配子与两种双交换型配子比较：双交换配子与亲本型配子中不同的基因位点位于中间，再计算基因间的交换值。 如：+ wx c与sh wx c相比只有sh位点不