分批发酵补料分批发酵与高密度发酵.pptVIP

8. 补料的目的及其意义 a. 维持菌体正常代谢，推迟自溶期；b. 延长产物合成期； c. 可以维持较高的产物增长幅度； d. 增加发酵液总体积； e. 纠正异常发酵，控制pH，代谢方向。 如：四环素发酵生产时：不补糖，周期 72~96h，产率：5.5~7kU/ml 补糖时，周期 120~130h，产率：10~12kU/ml 9. 补料的控制 1）无反馈控制操作 恒定流速补料和指数流速补料属于此类，无反馈控制操作是补料流速不随培养液变化而变化，人为地预先设定好。 2）反馈控制操作 恒定底物浓度操作属于此类，反馈控制操作是通过传感器直接测量培养物生长的特定参数，进而根据参数的变化来调节物料向培养物中补加的速率，使培养物参数保持恒值或最优值。 第三十一张，课件共四十六张，编辑于2022年5月 ** 反馈控制分为：直接法和间接法； a. 直接法：以限制性底物（C，N，C/N）浓度为反馈控制参数； b. 间接法：以DO，pH，呼吸商，排气中CO2分压，代谢产物浓度为反馈参数。 **反馈控制系统的组成：传感器，控制器，驱动器，补料系统等； 10. 不同培养基组成采用各种自动流加控制指标： 工业上所用的培养基组成是各种各样的，见下表。 第三十二张，课件共四十六张，编辑于2022年5月 2. 补料分批发酵动力学 1） 补料分批发酵 通常用下列方程式来定量地表示连续补料工艺的参数变化： 线性补料：Fin (t) =α1t+β1 指数补料：Fin (t) =α2e β2t 培养液体积：V（t）=V0+Fin · t dV/dt = Fin(t) ---------------------------------------------------------------------------------(H1) α和β是常数，当用恒定流速补料时，α1= 0，V0为起始培养液体积。 如果：连续补料系统具有以下特征：（1）充分混合的反应器；（2）单一限制性底物；（3）平衡生长 （4）恒定的得率系统（Y）；（5）符合Monod动力学方程。 那么：菌体总量的瞬时变化可表示为： d(VX)/dt = (dV/dt)X + (dX/dt)V =μXV -------------------------------------------------------------(H2) 从 H1 和 H2可得到： dX/dt =μX – (Fin/V)X = [(μmax·S)/(ks+S)]X - (Fin/V)X ----------------------------------------------------(H3) 第三十三张，课件共四十六张，编辑于2022年5月 第一张，课件共四十六张，编辑于2022年5月 分批发酵是指生物反应器的间歇操作, 在发酵过程中,除了不断进行通气(好氧发酵)和为调节发酵液的pH而加入酸碱溶液外, 与外界没有其它物料交换。这种培养方式操作简单, 是一种最为广泛使用的方式。分批发酵的主要特征是所有工艺变量都随时间而变化。主要的工艺变量是各种物质的浓度及其变化速率。(见下表)　　 微生物工艺中的变量及其变化速率 rx 第二张，课件共四十六张，编辑于2022年5月 分批发酵的思考 在分批发酵中, 低浓度培养基中的营养物会迅速耗尽, 引起培养物过早地从指数生长期向稳定期转变。 提高底物浓度的优点与不足: a. 提高底物浓度可以延长微生物的指数生长期, 从而提高发酵的容量产率和产物浓度 。 b. 提高底物浓度(对于某些可溶性碳源来说, 微生物的 Ks 值多在1- 10mg/ L范围内,当超过10 Ks或 10 -100mg / L时,微生物就会以接近最大比生长速率 (μmax )的速度生长) c. 过高的底物浓度会造成一系列不利影响, 底物抑制, 培养基粘度升高引起传质效率降低等。克服 此不足的方法就是采用Fed-Batch法(补料分批技术) 第三张，课件共四十六张，编辑于2022年5月 一. 分批发酵 1. 分批操作工艺 分批发酵目的产物种类虽然不同, 但操作工艺基本相同. (见下图) 典型的