不规则抗体筛查微柱凝胶法方案设计.pdfVIP

不规则抗体筛查微柱凝胶法方案设计 1.不规则抗体的概述 不规则抗体是指ABO 血型系统外的其他血型抗体，也称为不完全抗体，多为 IgG 类抗体。不规则抗体是引起临床输血反应的主要原因之一，输血前不规则抗 体筛查有助于血液的选择，避免因为输注含有某抗体相应抗原的血液而引起严重 的溶血性输血反应。临床为确保安 全输血、诊断治疗新生儿溶血病等，对既往 史有输血、妊娠、血液病及输过血液制品的所有受血者和供血者及孕妇等都要求 常规检测不完全抗体以及受血者和供血者交叉配血是否相容。Coombs 试验是最 经典、最准确的检测不完全抗体(主要是1gG 类)的方法，抗人球蛋白检测卡是基 于Coombs 试验研制的产品，是目前临床最常用的不完全抗体检测和交叉配血的 方法。 2.病例导入 患者李某，女，36 岁。2020-12-02 因“停经7+月，阴道少量流血16+小时” 收治医院产科，入院诊断“先兆早产”，予以卧床休息，抑制宫缩，营养胎儿， 促胎肺成熟”等对症处理，于2020-12-10 好转后要求出院;今半小时前突感下腹 坠胀，伴阴道流出大量水样液体，随之感下腹阵发性胀痛，未伴阴道流血，自觉 胎动可。门诊以: “足月妊娠临产”收住院。查体体温36.7℃，脉搏74 次/分， 呼吸18 次/分，血压119/81mmHg。无发热、咳嗽、气促、鼻塞、流涕等。 3.检验方案 不规则抗体筛查 （微柱凝胶法） 4.不规则抗体筛选检测（微柱凝胶法） 4.1 检查仪器和试剂 低速离心机（见下图） TD—A 型医用离心机（见下图） FYQ 型免疫微柱孵育器（见下图） 不规则抗体筛检卡（见下图） 不规则抗体筛检试剂（见下图） 4.2 检验原理 将排阻层析和抗人球蛋白试验相结合，在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相 应的不完全抗体在抗人球蛋白的作用下发生凝集反应，形成不能通过凝胶间隙而 浮于凝胶表面或悬于胶中的红细胞免疫复合物，如无相应的不完全抗体结合，则 不能形成红细胞免疫复合物，离心后分散的红细胞可通过凝胶间隙而沉积在微柱 腔的底部。 4.3 标本要求 4.3.1 采血管与抗凝剂：受血者血样为紫色帽采血管EDTA-K₂抗凝静脉血（浓 度15g/L）。 4.3.2 采血量：抽取受血者静脉血1~2ml 于专用管内。 4.3.3 标本接收与拒收：标本采集后应立即送检，检验人员接收时应仔细核 对患者信息，标本类型与检查项目是否相符，观察标本是否有溶血、凝血情况等， 如标本不合格应拒收，重新采集送检。 4.4 操作步骤 4.4.1 将试剂卡做好编号标记。 4.4.2 分离被检者血浆：将标本放入离心机离心，离心后将上层血浆分离出 备用。离心时转速必须大于3000 转/分，时间2-3 分钟。 4.4.3 用低离子溶液将筛检红细胞或谱红细胞配成0.5%~0. 8%浓度的红细胞 悬液，分别加入标记好的微管中，各1 滴(或50 μL)。 4.4.4 分别立即加入被检者血浆1 滴(或50 μL)。 4.4.5 试剂卡加样后，放置于37°C 的孵育箱中孵育，时间为15 分钟。 4.4.6 使用专用的TD—A 型医用离心机离心，离心时间5 分钟，900rpm 2 分 钟，1500rpm 3 分钟。 4.4.7 离心后取出来，用肉眼直接观察判断结果，并做好记录。 4.5 结果判断 4.5.1 阴性结果:离心后红细胞沉积于微柱凝胶的底部。 4.5.1 阳性结果:离心后特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或上方。 4.6 检查结果（见下图）及分析 4.6.1 结果：不规则抗体一型阴性(-)、二型、三型阳性（+）。 4.6.2 正常范围：一型、二型、三型阴性（-） 4.6.3 分析：不规则抗体筛查阳性结果，提示可能会出现溶血的风险。之所 以会出现这种情况，有两种原因，一种是ABO 溶血，一种是Rh 溶血。ABO 溶血 是比较常见的，当父母的血型与孩子的血型不合时，就容易出现溶血的情况，多 见于母亲与孩子的血型不合。但是进行积极的抑制，就可以避免这种情况的产生， 而Rh 溶血的损伤较大，需要在孕期，积极的接种抗D 免疫球蛋白。 5．小结 通过选择不规则抗体筛查作为毕业设计选题，深入的了解到不规则抗体的注 意事项，以及有关实验室检查原理和步骤，更加进一步的了解血库的工作日常和 流程，也提高自身的操作能力，理论与实际相