HP1100 液相色谱使用指南（磺胺药分析）.docVIP

PAGE PAGE 5 HP1100 液相色谱使用指南 一．日常开机步骤 1. 打开计算机，进入windows 2000系统； 2. 依次打开HPLC 1100仪器各模块电源，等仪器自检通过并与计算机通讯成功（需1-2分钟），进入online工作站； 二．仪器运行及样品分析 1. 设置仪器条件 点击泵设置，出现如下画面，开始依次设置泵条件，包括流速（flow）、每次进样分析时间(stop time)、流动相比例（A、B、C、D通道）、流动相名称等。 分析磺胺类药物，设置条件如图所示。完成后点击 “OK”。 点击DAD检测器，出现如下画面，开始依次设置DAD检测器条件，包括吸收波长、扫描范围等。 分析磺胺类药物，设置条件如图所示。完成后点击 “OK”。 在File栏中，保存本次实验方法。 2. 系统平衡 开启泵，用实验所需比例的流动相和流速冲洗色谱柱，平衡约20 min； 开启检测器灯，约需20 min稳定时间。 3. 准备样品 样品进样前需用0.45 μm有机相滤膜或水滤膜过滤除去机械杂质，防止系统堵塞。 观察基线，填写sample information。等仪器Ready，基线平稳后可以进样分析。 4. 进样分析 进样前需用样品润洗进样器3次以上，针尖向上排出气泡，准确留出进样体积；分析易挥发组分时，需在进样前随进随取，避免样品或溶剂挥发影响测定的准确性；为确保进样量准确，可使用一定体积的定量管（定量环），但进样量要大，保证把定量管里的体积全部置换。将进样阀置于load的位置，左手扶针头右手端平顺畅地将针放入进样阀，右手缓慢将样品推入定量环，快速扳阀至inject位置，完成进样（进样针仍留在进样阀上不需取出，等下一次进样前再取出注射器，将阀置于load的位置），仪器自动开始计时。做标准曲线要从低浓度到高浓度进样，再做未知样品。 5. 每次色谱数据采集时间完成后，屏幕自动跳出report，关闭后可再次进样分析。 6. 样品全部分析完，关闭紫外灯和清洗管路 在DAD控制界面关闭紫外灯； 以0.2mL/min流速，100%甲醇清洗管路20分钟。再处理数据，做以下操作。 三．数据分析方法编辑:??? 1、 从“View”菜单中，单击“Data analysis”进入数据分析画面。 ??? 2、 从“File”菜单选择“Load signal”，选中您的数据文件名，如下图所示。单击OK。 ??? 3、积分（分析磺胺药不用做）??? (1) 从“Integration”中选择 “Auto integrate”，如积分结果不理想，再从菜单中选择“Integration Events”选项，选择合适的Slope sensitivity，Peak width，Area reject，Height reject。??? (2) 从“Integration”菜单中选择“Integrate”选项， 则数据被积分。??? (3) 如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。??? (4) 单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。 4、标准曲线的建立 调出标准样品1号的色谱图（步骤2） 点击Calibration建立新的校正表 点击calibration settings，设置单位 调出标准样品2号的色谱图，如下图加一级，点击“OK”。 依次类推，将所有的标准样品都加入后，点击“OK”。 在校正表中输入样品名称，加入每个标准样品各组分的浓度。右下图出现标准曲线，如果有杂质组分的数据，用鼠标选中整行，点击“delete”删除。 调出待测样品的谱图，设定报告 6、打印报告: ??? (1)、从“Report”菜单中选择“LJ Cui report”选项，进入如上画面。??? (2)、单击“Quantitative Results”框中Calculate右侧的黑三角，选中ESTD%（外标法），其它选项不变。??? (3)、单击Ok.??? (4)、从“Report”菜单中选择“Print report”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则单击Report 底部的“Print”钮。??? 四．关机： ??? ● 退出化学工作站及其它窗口，关闭计算机（用shut down关）。??? ● 依次关掉Agilent 1100各部件电源开关。???