自己翻译的罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书.pdfVIP

自己翻译的罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书.pdf

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罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书 注意:Label 溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴,严禁吸入和食入。 反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中,按有毒废物处理。 试剂盒组成: 小瓶/盖子 标签 内容物 1 蓝色 酶溶液 大肠杆菌重组牛胸腺末端脱氧核苷酸转移 酶,在storage buffer 中 10×conc. 5 ×50ul 2 紫色 标记溶液 在reaction buffer 中的核苷酸混合物 1×conc. 5×550ul 3 黄色 转化-POD 抗荧光素抗体,绵羊 Fab 片段,连接有辣根 过氧化物酶 Ready-to-use 3.5ml 需要自己配置的其他物品: 除上表所列试剂外,还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览: 步骤 设备 试剂 样品准备section 3.2 黏附细胞,细胞涂片和细 Washing buffer:磷酸缓冲液PBS* 胞 离 心 涂 片 准 备 Bloking buffer 封闭缓冲液:溶于甲醇的3%H2O2 section3.2.1 Fixation solution 固定剂:溶于PBS 的 4%多聚甲醛, 冰冻组织section3.2.2.2 ph7.4 ,新鲜配制 Permeabilisation solution 渗透溶液:溶于0.1%柠檬酸钠 的0.1%Triton X-100,新鲜配制(6 ) 固定剂 石 蜡 包 埋 组 织 二甲苯和乙醇(浓度:95%,90%,80%,70%,溶于双 section3.2.2.1 蒸水中) Washing buffer:PBS* 蛋白酶K*,不含核酸酶,工作浓度:[10-20ug/ml,溶于 10mM Tris/HCL 中,ph7.4-8] 替代处理方案 1 ※渗透溶液:(0.1%Triton ) X-100 ,溶于 0.1%柠檬酸 钠的,新鲜配制 ※胃蛋白酶* (0.25%-0.5%,溶于盐酸中,ph2 )或胰蛋 白酶*,0.01N HCL,不含核酸酶 ※0.1M 柠檬酸缓冲液,ph6 ,微波照射 标记步骤 section3.3 阳性对照 section3.3.1

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