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- 2022-06-22 发布于广东
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猪细小病毒SYBRGreenI荧光定量PCR诊断试剂盒的研制(农学毕业资料)
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:猪细小病毒SYBRGreenI荧光定量PCR诊断试剂盒的研制 2
文2:猪细小病毒病的综合防治 11
( 一) 病原 11
(二)流行病学 12
(三)临床症状 12
(四)病理变化 13
(五)诊断 13
(六)预防措施 13
(七)治疗措施 14
参考文摘引言: 14
原创性声明(模板) 15
文章致谢(模板) 16
正文
猪细小病毒SYBRGreenI荧光定量PCR诊断试剂盒的研制(农学毕业资料)
文1:猪细小病毒SYBRGreenI荧光定量PCR诊断试剂盒的研制
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.01.033
Developing A SYBR Green I Fluorescent Quantitative PCR Kit for Detecting of PPV
YU Bo,ZHOU Si-xuan,TAN Shi-wen,XU Jing-e,SHI Kai-zhi,YANG Li
(Guizhou Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Guiyang 550005, China)
Abstract: Based on the VP2 gene sequences of PPV in GenBank, one pairs of specific primer was designed for amplifying the specific fragments of VP2 gene. The amplified VP2 gene of PPV was cloned into pMD-18T vector and used as positive standard. After optimizing annealing temperature and primers concentrations, a SYBR Green I fluorescent Quantitative PCR was established for simultaneously detecting PPV. The melting curve analysis using SYBR Green I dye showed one specific peak. No primer-dimers peak was observed. No amplification was amplified from PRV, PCV-2, E.coli, CSFV, PRRSV with the SYBR Green I Real-time Quantitative PCR. The PCR kit was highly sensitive to 1.0×101 copies/μL DNA. It is revealed that the SYBR Green I Real-time Quantitative PCR kit was sensitive, specific with good repetition. It could be used to detect PPV in clinical samples.
Key words: PPV; VP2 gene; SYBR green I fluorescent quantitative PCR
收稿日期:2014-09-29
基金项目:贵州省农业攻关项目[黔科合NY字(2010)3085];贵州省畜禽健康养殖技术创新能力建设项目[黔科合院所创能(2010)4004]
作者简介:余 波(1981-),男,四川邻水人,副研究员,硕士,主要从事兽医分子生物学研究,(电话)(电子信箱)yubonky@163.com;
通信作者,谭诗文(1956-),男,研究员,主要从事兽医分子生物学研究,(电子信箱)swleiden@sina.com。
猪细小病毒(Poreine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原体之一,可导致母猪流产、死胎,给养猪业造成了巨大的经济损失[1-3]。目前,对该病的诊断方法包括传统的病毒分离鉴定,以及血清学诊断方法,如ELISA、
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