杆状病毒表达系统杆状病毒滴度测定全攻略.pptxVIP

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杆状病毒表示系统;杆状病毒表示系统;Overview;Bac-to-Bac 表示系统组成和工作原理;Bac-to-Bac 表示系统组成和工作原理;Expermiantal outline;Insect Cell Lines:;Atmosphere:air, 100% ;重组pFastBac质粒构建;重组Bacmid产生;重组Bacmid判定;取得重组杆状病毒——转染Sf9 cells;病毒扩增蛋白表示;杆状病毒滴度测定;BacPAK? Rapid Titer Kit;;注意事项:;疫苗免疫动物后免疫效力评价;ELISA抗体;微量中和试验技术;中和试验原理;分 类;材 料;固定病毒—稀释血清法;;将96孔细胞培养板放入37 ℃ 5% CO2培养箱中作用45 min—60 min。 感作完成后每孔加入100 μl细胞悬液,继续置37℃ 5% CO2培养箱培养,逐日观察并统计结果,普通要观察4-5天。 结果计算,按Reed-Muench两氏法或Karber法进行。;;距离百分比=(高于50%保护率-50% )/(高于50%保护率-低于50%保护率) =(66.7-50)/(66.7-16.7) =0.33 ;固定血清—稀释病毒法;;注意事项:;细胞免疫检测;脾细胞分离: ;外周血单核细胞分离 : ;细胞因子定量PCR检测: ;细胞因子ELISA检测: ;细胞免疫检测注意事项:;谢谢

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