颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究(医疗卫生论文资料).docVIP

颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究(医疗卫生论文资料).doc

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颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究(医疗卫生论文资料) 文档信息 : 文档作为关于“医学心理学”中“麻醉学”的参考范文,为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文5453字,doc格式,可编辑。质优实惠,欢迎下载! 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1:颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究 2 1 资料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2:妊高征与血管紧张素转换酶基因多态性的相关性研究 6 1 资料和方法 6 2 结果 7 3 讨论 7 参考文摘引言: 8 原创性声明(模板) 9 文章致谢(模板) 10 正文 颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究(医疗卫生论文资料) 文1:颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究 由颈动脉粥样硬化斑块导致的颈动脉狭窄,是引起脑缺血性低灌注和颅内动脉栓塞的主要原因之一〔1〕。载脂蛋白E(ApoE)是血浆中主要载脂蛋白之一,其基因多态性是决定血脂水平进而影响颈动脉粥样硬化病变发生、发展的遗传因素之一。本文对两者之间的关系进行研究。 1 资料与方法 一般资料 颈动脉狭窄组:选取住院病人62例,均经全脑血管造影证实为颈动脉狭窄,其中狭窄≥50% 29例,狭窄 标本采集 所有入选患者禁食12 h后,抽清晨空腹血5 ml,其中2 ml血(EDTA 抗凝)常规提取DNA 进行ApoE基因多态性分析;3 ml血测定血脂、血糖等生化指标。 血脂和载脂蛋白测定 血标本采集后,在同一台Beckman公司 SYNCHRON CX7全自动生化分析仪进行总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)、载脂蛋白A(ApoA)与载脂蛋白B(ApoB)测定。 ApoE的基因型分析 使用DNA提抽试剂盒常规提取基因组DNA,采用聚合酶链反应扩增ApoE基因片段,引物参考国外文献〔2〕,取ApoE第四外显子中包含编码第112位和158位氨基酸的一段基因序列用于分析ApoE基因多态性,PCR扩增产物为244 bp。引物序列:P1:5′ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC3′;P2:5′TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA3′,引物由上海生工合成。PCR反应体系为50 μl,2×Buffer 25 μl,dNTPs 4 μl,P12 μl,P22 μl,MgCl2 3 μl,Taq酶 U,模板DNA 400 ng以上,二甲基亚砜 5 μl (10%)。反应条件:95℃预变性12 min;变性:95℃ 1 min;退火:60℃ 2 min;延伸:72℃ 2 min。共30个循环,72℃延伸10 min。 扩增产物在244 bp处可看到清晰的条带。再取PCR扩增成功的产物17 μl,加入HhaⅠ限制内切酶5 U,10×Buffer 2 μl,37℃水浴消化4 h以上。将酶切产物置于非变性丙烯酰胺凝胶电泳约4 h。银染法染色,观察结果并拍照。 统计学处理 ApoE基因频率采用频率计数法计算,统计用χ2检验,血脂等采用独立样本的t检验。全部统计分析采用统计软件。 2 结果 颈动脉狭窄组和对照组血脂和载脂蛋白水平比较 颈动脉狭窄组的TC、TG、LDLC水平均较对照组升高(P 表1 颈动脉狭窄组和对照组血脂和载脂蛋白水平比较(略) 颈动脉狭窄组和对照组ApoE基因型和等位基因频率分布 两组的基因型分布无差别;颈动脉狭窄组的ε3等位基因频率较对照组显著减少(P 颈动脉狭窄组不同年龄和性别等位基因频率分布 不同性别间及年龄≥60岁和 颈动脉狭窄患者按狭窄程度分组后等位基因频率分布 狭窄≥50%的患者和狭窄 表2 颈动脉狭窄组和对照组ApoE基因型和等位基因频率分布(略) 表3 两组ε2、ε3、ε4等位基因频率分布(略) 与对照组比较:1)P 表4 不同性别、年龄组颈动脉狭窄组等位基因频率分布(略) 表5 轻、重度颈动脉狭窄组ApoE基因型及等位基因频率分布(略) 3 讨论 ApoE基因位于第19号染色体上,ApoE常见的3种等位基因ε2、ε3、ε4分别编码产生3种主要的ApoE异构体ApoE2、ApoE3和ApoE4。ApoE基因多态性导致人群中存在6种不同基因型,包括3种纯合体(ε2/ε2、ε3/ε3、ε4/ε4),3种杂合体(ε2/ε3、ε3/ε4、ε2/ε4) ApoE在颈动脉粥样硬化中的发病机制具有重要作用。许多研究表明:ε4等位基因与高水平血浆TC、高水平LDLC显著相关;Dallongeville等〔3〕从17个国家45个人群样本分析证实,携带ε4和ε2者较ε3 /3表型者有更低

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