肺炎支原体及耐药位点核酸检测.pptVIP

地址：郑州市经开区经南三路168号院5号楼3层 网址： 邮箱：huawoyiliao@ 电话：0371 服务电话：400-803-0371 1 流行病学分析 2 肺炎支原体耐药现状 3 大环内酯抗生素耐药机制 目录 CONTENT 5 肺炎支原体耐药与临床 3 体内诱导耐药株 Part 1 4 1 肺炎支原体及耐药突变检测 项目简介 p1302 儿童肺炎支原体肺炎 社区获得性肺炎(Community acquired pneumonia,CAP) 肺炎支原体肺炎 (Mycoplasma pneumoniae,MP) MP 占CAP的10~40%。 支原体：是介于细菌与病毒之间的微生物。已发现约60种，14种可致病. 致呼吸道感染：肺炎支原体最常见，沙眼衣原体次之。 实验室诊断：病原学检查 包括：培养 血清学（特异性：Ag、Ab；非特异性）、 核酸诊断技术（PCR ） 分离培养： （1）咽喉、鼻咽、胸水或体液中分离培养出MP是诊断MP感染的可靠标准。 （2）需10~14天或更长，早期诊断意义不大，用于回顾性诊断和研究。 （3）快速培养敏感性和特异性均不高，价值有限。 儿童肺炎支原体肺炎诊治专家共识. 中华实用儿科临床杂志.2015，30（17）：1304 病原学检查：血清学 特异性诊断：检测抗原和抗体 1.明胶颗粒凝集试验（PA）：检测IgM和 IgG混合抗体。 单次抗体滴度≥1:160，诊断近期感染参考价值。 恢复期和急性期双份抗体滴度：4倍/4倍以上增高/减低时，确诊价值 2.酶联免疫吸附试验（ELISA）：可分别检测IgM和IgG， 单次MP-IgM阳性：对诊断MP的近期感染有价值。 恢复期和急性期IgM或IgG抗体滴度呈4倍或者4倍以上增高或减低时，可以确诊为MP感染。 非特异性诊断：冷凝集试验（CA），参考价值。 MP感染时阳性率仅为50%左右； 腺病毒、巨细胞病毒、EB病毒等感染也可诱导血清冷凝集素的产生。 儿童社区获得性肺炎管理指南. 中华儿科杂志.2013，51（10）：745 成人肺炎支原体肺炎诊治专家共识，中华结核和呼吸杂志，2010,33（9）：643 病原学检查：血清学 MP-IgM： (1) 病程：感染后早期抗体，一般感染后4~5天出现，检测太早可假阴性。持续 1~3个月甚至更长； (2)年龄： 婴幼儿免疫功能不完善，产生抗体能力低，可出现假阴性或者低滴度的抗体，评价结果时需考虑患儿的病程及年龄。 (3) 厂家及方法：试剂盒生产厂家和检测方法不同，判断的阳性结果值有所差异。 病原学诊断：核酸诊断技术 方法：RT-PCR、环介导等温扩增（LAMP）技术、RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT）技术等。 优点： （1）特异性强、敏感、快速，可用于早期诊断。 （2）核酸扩增技术不受年龄、抗体产生能力、病程早晚及用药因素干扰，感染早期检测率最高。 注意：与感染后携带状态鉴别。 有研究显示，MP感染后1个月，其DNA的检出率仍然高达50%， MP-DNA持续携带的中位数时间为7周，个别达7个月之久。 联合检测：血清学和核酸检测联合，提高检出率。 小结 无论是分离培养， 血清学检测， 还是分子生物学检测， 都存在各自的局限性， 目前学者多推荐采用 2 种或 2 种以上诊断方法相结合，以提高诊断的准确性。针对不同的诊断方法，具体分析实验中出现的结果不一致现象，适当调整试验方法， 综合考虑临床、 经济性以及可操作性等问题，探索并制定出更适合于临床的快速、 准确、 经济的诊断方法， 必将推动 MP 感染临床诊断和治疗的进一步发展。  治疗肺炎支原体肺炎常用抗菌药物： 大环内酯类 氟喹诺酮类 四环素类 抗感染治疗的疗程通常需要10-14天，部分难治性病例的疗程可延长至3周左右 用药治疗 大环内酯类：首选 机理：与MP核糖体的特殊靶位的蛋白质结合，阻断转肽酶作用，感染mRNA移位，选择性抑制MP蛋白质合成。 种类： 第一代：红霉素 第二代：阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素； 第三代酮内酯类：泰利霉素（telithromycin）,塞红霉素（cethromycin) 用于MP治疗的主要是1、2代，三代尚未用于儿童。 儿童社区获得性肺炎管理指南（2013修订），中华儿科杂志，2013,51（10）：745 大环内酯类抗生素耐药形势严峻！ 自2001年日本首次分离到对大环内酯类抗生素耐药的MP后，世界多 国相继报道出现MP耐药株，日本及中国MP耐药率明显高于其他国家。 日本MP对大环内酯类抗菌药物的耐药率