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第六章微生物遗传变异;几个基本概念;遗传(heredity或inheritance)和变异(variation)是生物体最本质的属性之一。
在遗传性适宜的环境条件下时,通过代谢和发育才能使其后代转化为与亲代相同的具体性状。
;关于微生物遗传变异的物质基础及其存在形式。
关于微生物基因突变的基本原理(类型、特点和机制)。
关于微生物基因重组的基本原理(方式和特点)。
微生物菌种退化的原因;掌握菌种复壮的方法、防止菌种退化的措施以及菌种保藏的方式和原理。;第一节 微生物遗传变异的物质基础 ;;以上???果表明;(二)噬菌体的感染实验 ;The Hershey-Chase experiment;(三)烟草花叶病毒的拆开与重组实验 ;后来他又将甲、乙两种变种的烟草花叶病毒拆开,在体外分别将甲病毒的 RNA和乙病毒的蛋白质结合,将乙病毒的RNA 和甲病毒的蛋白质结合进行重组。
接着他把这些经过重组的病毒分别感染烟草。结果从寄主分离所得的病毒蛋白质均取决于相应病毒的 RNA。证明了核酸(RNA)是烟草花叶病毒的遗传物质基础。;; ;Three representations of DNA、;1、遗传物质在细胞中的存在方式 ;;2、基因;基因调
控系统;;;原核生物的质粒;几种细菌的质粒;⑶Col因子(colicinogenic factor):即产大肠杆菌素因子。许多细菌都能产生使其他原核生物致死的蛋白质类细菌毒素。大肠杆菌素(colicin)具有通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死其他肠道细菌的功能。
;⑷Ti质粒(tumor inducing plasmid):即诱癌质粒。
⑸巨大质粒(mega plasmid):在根瘤菌属中发现的一种质粒,其上有一系列固氮基因。
⑹降解性质粒: 只在假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码,从而能利用一般细菌所难以分解的物质作碳源。
;3、遗传信息的传递;4、DNA的复制;三、DNA的变性和复性;三、DNA的变性和复性;四、RNA ;五、遗传密码;六、蛋白质的合成;第二节 微生物的基因突变;基因突变的机理;;基因突变及其机制;基因突变的机理;紫外辐射诱变机制;微生物能以多种方式去修复被紫外线损伤后的 DNA,主要方式有两种:;(2) 暗修复作用。也称切除修复作用。;;DNA损伤修复的其他方式;定向培育和驯化;第三节 微生物的基因重组;原核微生物的基因重组(一)转化(transtormation);受体细胞的感受态(petence);转化过程的几个时期:;原核微生物的基因重组(二)转导(transduction );普遍性转导( generalized transduction);原核微生物的基因重组(三)接合(conjugation );雌性细菌不含F 因子,称为F - 菌株,
雄性细菌含有游离存在的F 因子,称为F + 菌株,
当雄性细菌细胞中所含的F 因子被整合在细胞核的DNA 上,不呈游离状态存在称为Hfr 菌株(高频重组菌株);
有时被整合在细胞核DNA 上的F 因子,从DNA上面脱落下来,呈游离存在,但在脱落时,F 因子有时能带一小段细胞核 DNA。我们将这种含有游离存在的但又带有一小段细胞核DNA 的F 因子的细菌称为 F′菌株。
;接合:是细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌。;原核微生物的基因重组(四)原生质体融合;原生质体融合的一般原理和主要过程;原生质体融合育种 ;;原核微生物的基因重组(五)溶源性转变;; 第四节菌种的退化、复壮与保藏;菌种复壮的方法:
(一)纯种分离
稀释平板法、平板划线法等
显微操作将生长良好的单细胞或单孢子分离出来
(二)通过寄主进行复壮
适用于寄生性微生物,接种到相应寄主体内能够提高菌株对宿主的感染力。
(三)淘汰已衰退个体
如用低温处理 streptomyces microflows “5406”抗生菌的分生孢子采纳-10~-30℃低温处理5-7天,使其死亡率达到80%,保留存活个体达到复壮目的。;二、菌种的保藏;;;第五节 基因工程技术在环境保护中的应用;基本操作包括:;基因工程菌株的构建;2、处理目的基因 依照基因工程的“设计蓝图”的要求,在从供体细胞中提取出的目的基因中加入专一性特别强的限制性核酸内切酶进行处理,从而获得带有特定基因并暴露出粘性末端的DNA单链部分。必要时这种粘性末端也可用人工方法合成。
对作为载体的细菌质粒或噬菌体DNA可采纳与处理目的基因同一种类的限制性核酸内切酶进行处理,使其形成并暴露出与目的基因相应的粘性末端。
;3、体外重组 将上述分别处理过的目的基因和细菌质粒DNA片段(或噬菌体核酸)放在试管中,在
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