氨基酸与蛋白质的一级结构.ppt

不同pH值时所带电荷 pH=pI 氨基酸呈电中性，电泳不移动 pHpI 氨基酸带正电荷，向阴极移动 pHpI 氨基酸带负电荷，向阳极移动 在一定pH范围中，溶液的pH离AA等电点愈远，AA带净电荷愈多，泳动速度越快。 第23页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 补充：化学性质 亚硝酸反应 烃基化反应 酰化反应 脱氨基反应 西佛碱反应 成盐成酯反应 成酰氯反应 脱羧基反应 叠氮反应 侧链反应 茚三酮反应 成 肽 反 应 第24页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 除Pro生成黄色化合物外,其它AA生成蓝紫色化合物（570nm）; 与茚三酮反应（27） 用途：常用于氨基酸的定性或定量分析。 茚三酮 水合茚三酮 第25页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 补充：含氮量稳定 氨基酸的结构通式为α氨基酸。蛋白质除含C,H,O外，还含有N。AA平均分子量为110。 不同蛋白的含氮量皆在16%左右。只需测定N含量， N含量/16%即为蛋白含量。 ----凯氏定氮法的理论基础 第26页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 第二节、氨基酸的分离分析 根据R基的极性。原理：分配层析。 ①滤纸层析： ②薄层层析： 根据氨基酸的净电荷及R基的极性： ③离子交换层析： 阴离子交换树脂-N(CH3)3OH，阳离子交换树脂-SO3H 根据氨基酸的净电荷及质点大小： ④电泳： 第27页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 分配层析的一般原理 层析法――色层分析法（色谱）　　系统的组成　固定相（静相）　　　　　　　　流动相（动相） 分配定律――当溶质在两种给定的互不相溶的溶剂中分配时，在一定的温度下达到平衡后，溶质在两相中的浓度比值为一常数.此比值即分配系数（kd）。 第28页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 一）纸层析 固定相：纤维素上吸附的水　流动相：展层溶剂，有机相层析时，混合AA在两相中不断分配，疏水性强的AA在固定相水中溶解度较小，与水的作用力也较小，随展层剂的展层（移动）也移动较远距离（迁移率Rf大）。 极性强的Rf值小，疏水性强的Rf大。 分离、鉴定AA混合物的方法。 第29页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 将下列每组混合物分别用正丁醇-醋酸-水进行纸层析，指出每组的相对迁移率。 (1) Val和Lys; (2) Phe和Ser; (3) Leu、Ala、Ser 第30页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 第三节 肽和蛋白质 一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基之间失水形成的酰胺键称为肽键，所形成的化合物称为肽。 一、肽、肽键与肽链 由两个氨基酸组成的肽称为二肽，由几个到几十个氨基酸组成的肽称为寡肽，由更多个氨基酸组成的肽则称为多肽。组成肽链的氨基酸单元称为氨基酸残基。 第31页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 在多肽链中，氨基酸残基按一定的顺序排列，这种排列顺序称为氨基酸顺序。 方向性：一条多肽链有两个末端，自由?-氨基，称为氨基端或N-端；游离?-羧基，称为羧基端或C-端。 氨基酸的顺序：N-端→C-端 如上述五肽可表示为：Ser-Val-Tyr-Asp-Glu 丝氨酰缬氨酰酪氨酰天冬氨酰谷氨酸 肽单位 主链： 侧链 第32页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 二、肽的解离性质 肽具有酸碱两性性质和等电点。肽的酸碱性质主要来自游离末端?-NH2和游离末端?-COOH以及侧链R上可解离的基团。每一种肽都有其相应的等电点。末端?-NH2,?-COOH比游离氨基酸的酸碱度降低。 第33页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 第34页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 三、生物活性肽 在生物体中，多肽最重要的存在形式是作为蛋白质的亚单位。 但是，也有许多分子量比较小的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有特殊的生理功能，常称为活性肽。 如：脑啡肽；激素类多肽；抗生素类多肽；谷胱甘肽；蛇毒多肽等。 部分肽中含有D-氨基酸。 第35页，共69页，2022年，5月20日，9点32分，星期五 CO-NH-CH-CO-NH-CH2-COOH CH2 CH2 CHNH2 COOH CH2 SH ? ? ? 1.参与体内氧化还原反应 2.作为辅酶参与氧化还原反应 保护巯基酶或含Cys的蛋白质中