微生物的实验室培养.pptVIP

1、平板划线法 第六十页，共九十二页。 问题讨论 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 第六十一页，共九十二页。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 第六十二页，共九十二页。 2.稀释涂布平板法: (1)系列稀释操作: 第六十三页，共九十二页。 问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 第六十四页，共九十二页。 涂布平板操作 讨论:涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯 与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、 吸管要在酒精灯火焰周围；等等。 第六十五页，共九十二页。 练习1（多项选择） 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌 2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是 A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐 C 蛋白质 D 无机氮化物 3、下列叙述不正确的是 A 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B 液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同 C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 A.C A.C B.C. 第二十八页，共九十二页。 (1)按物理状态分 液体培养基 固体培养基 3.分类 ——加入凝固剂（如琼脂） 第二十九页，共九十二页。 固体培养基：菌落，菌苔 第三十页，共九十二页。 液体培养基： 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 第三十一页，共九十二页。 半固体培养基： 无动力 有动力(弥散) (是否运动) 第三十二页，共九十二页。 3.分类 (2)按用途分 选择培养基 鉴别培养基 ------选择菌种 ------鉴别菌种 第三十三页，共九十二页。 连线下列选择培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌： 分离金黄色葡萄球菌： 分离固氮菌： 分离自养型微生物： 无氮培养基的培养基 不含有机物的培养基 高浓度食盐培养基 加入青霉素的培养基 第三十四页，共九十二页。 伊红-美蓝培养基 金属光泽深紫色菌落 第三十五页，共九十二页。 3.分类 (3)按成分分 天然培养基 合成培养基 ------成分未知，来源有限 ------成分已知 第三十六页，共九十二页。 血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分 人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。 第三十七页，共九十二页。 （三）无菌技术 1、获得纯净培养物的关键: 2、无菌技术包括的四大方面(参看教材15页) 3、消毒与灭菌 (1)消毒： 概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。包括芽孢和孢子吗？ 方法: 煮沸消毒法 巴氏消毒法:如牛奶的消毒 化学药剂消毒:酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等 紫外线消毒 (不包括芽孢和孢子) 防止外来杂菌的入侵 第三十八页，共九十二页。 （2）灭菌 概念：使用强烈的理