中国药典卫生学检验培训中国药典-微生物检查法.pptxVIP

200年版中国药典卫生 学检验培训2010年版中 国药典-微生物检查法|主要内容 中国药典2019年版微生物限度检查法 增修订内容简介 二、培养基适用性实验的实施与操作 三、白色念珠菌的检查 四、微生物限度检查方法验证试验 五、微生物限度检查面临的问题|一中国药典2019年版微生物限度 检查法增修订内容简介|中国药典2019年版框架(卫 无菌检查法 微生物限度检查法 灭菌法 抑菌效力检查法指导原则 药品微生物检验替代方法验证指导原则 微生物限度检查法应用指导原则 药品微生物实验室规范指导原则 卫|2019年版微生物限度检查法修订 2019年版《中国药典》微生物限度检查法 附录XIC(一部 附录X (二部 引入培养基适用性实验 增加白色念珠菌检查法 贴膏剂检查方法的改进 限度标准表示方法改变|2019年版微生物限度检查法修订 附录107页，微生物限度检查法 供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂 或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生 长和存活无影响无毒性。 除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温 度为30~35C;霉菌、酵母菌培养温度为23 28C控制菌培养温度为3537C 检验结果以1g、ml、10g、10ml、10cm为单位 报告，特殊品种可以最小包装单位报告|2019年版微生物限度检查法修订 2、附录107页，检验量 除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或1Oml 中药膜剂为50100cm?贵重药品、 微 量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门 菌的供试品，其检验量应增加20g或20m！(其中 10g或10ml用于阳性对照试验|2019年版微生物限度检查法修订 3、附录107页，膜剂供试品 取供试品50100cm?，剪碎，加5Oml或 100ml的pH7.0无菌氯化钠-蛋白陈缓冲液必要 时可增加稀释液，浸泡，振摇，作为110 或1:20的供试液|2019年版微生物限度检查法修订 附录108页，新增贴膏剂供试品 取规定量供试品，去掉贴剂的保护层，放置在无菌玻璃 或塑料片上，粘贴面朝上。用适宜的无菌多孔材料(如 无菌纱布覆盖贴剂的粘贴面以避免贴剂粘贴在一起。 然后将其置于适宜体积并含有灭活剂(如聚山梨酯80或 卵磷脂的稀释剂中，用力振荡至少30分钟，或以其他 方法制备成供试液。 5、附录108页，修订离心沉淀法 取一定量供试液，500转/分离心3分钟，取全部上清液 混合。用于细菌检查。 附录108页，增加计数培养基的适用性检查|2019年版微生物限度检查法修订 附录109页，增加表1常见干扰物的中和剂或灭活方法 7 干扰物 可选用的中和剂回灭活方法 亚砍酸每纳 戊二醒 酌类、乙醇、吸附物 稀释剂 醒类 稀释剂、甘氨酸、确代骗酸盐 季铵类化合物(QAcs)、对轻基苯甲酸弱 那磷脂、聚山梨醇 类制剂 亚硫酸氢纳、基乙酸盐、硫代砍酸盐 双腿类化合物 那磷脂 碘酒、洗必泰类 聚山梨醇醒 卤化物 硫代砍酸盐 乙二胶四乙酸(EDTA 镁或钙离子 碱胶类 对氨基苯甲酸 B-内酥胶类抗生素 B-内酥胶确|2019年版微生物限度检查法修订 附录109页，增加 8 若没有适宜的方法消除供试品中的抑菌作用，那么验证试验中微生物 回收的失败可看成是因供试品的抗菌活性引起的，同时表明该供试品 不能被试验菌污染。然而，供试品也可能仅对试验用菌株具有抑制作 用，而对其他菌株没有抑制作用。因此，根据供试品须符合的微生物 限度标准和菌数报告规则，在不影响检验结果判断的前提下，应采用 能使微生物生长的更高稀释级的供试液进行方法验证试验。若验证试 验符合要求，应以该稀释级供试液作为最低稀释级的供试液进行供试 品检验。 计数方法验证时，若采用上述计数方法总存在一株或多株试验菌的回 收率达不到要求，那么选择回收情况最接近要求的方法和试验条件进 行供试品的检测。|2019年版微生物限度检查法修订 附录109页，修订供试品检查(法 取按验证的方法制备的均匀供试液， 按计数方法的验 证试验确认的程序进行供试液制备。用pH7.0无菌氯化钠 蛋白膝缓冲液稀释成1:10、1:10?、1:10等稀释级。 1.平皿法 采用平皿法进行菌数测定时，应取适宜的连续23个稀 释级的供试液。|2019年版微生物限度检查法修订 0、附录109页，修订培养和计数 除另有规定外，细菌培养(48小时3天，逐日点计菌落数， 一般以(48小时3天的菌落数报告;霉菌、酵母菌培养 72小时5天，逐日点计菌落数，一般以(72小时5天 的菌落数报告;必要时，可适当延长培养时间至(57 天进行菌落计数并报告。|2019年版微生物限度检查法修订 附录109页，修订菌数报告规则 细菌、酵母菌宜选取细菌、酵母菌平均菌落数在30~ 00之间小于300cfu、霉菌宜选取平均菌落数在30~ 00之间小于100c