免疫定性项目性能验证.pptVIP

特异性验证（干扰） 特定病原体以外感染性疾病患者的样本。 含有干扰性物质的样本：类风湿因子（RF）阳性、含异嗜性抗体、溶血、脂血、高胆红素样本。 结果判断：非特定病原体感染患者样本均应为阴性。含一定浓度干扰物质的样本检测应为阴性。 5. CUT-OFF重复性和测定下限验证 CUT-OFF重复性验证：样本浓度应接近临界值。不宜用阴性或强阳性样本。 批内和批间变异验证：高、中和低三个浓度（与试剂盒说明书中所述相适应） 临界点的定义 同样一份样本，在多次重复实验中各有50%的几率获得阳性或阴性的结果时该分析物的浓度。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 临界点（CUT-OFF)与试剂盒判断值（CUT-OFF值）的区别 这里的临界点指的是一个处于试剂检测临界点的样本浓度，其一旦确定，是不变的。 试剂盒CUT-OFF值指的是一个判断某一次测定结果的由阴性和阳性对照信号值按一定公式计算出来的信号值，每次测定都会有所差异。 (1) CUT-OFF重复性验证 CUT-OFF的重复性（同时包含测定下限 的验证） 批内变异的验证 批间变异的验证 验证步骤 制备足够40次重复检测的3份样本：分别为处于临界浓度、高于临界浓度20%和低于临界浓度20%的样本。 重复检测样本40次，确定每一份样本结果为阳性和阴性的百分比。 评价临界浓度是否准确？评价+20至-20%的浓度范围是否包含于、位于或者超出这种方法的95%区间？ CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline C50是否准确？ 40次测试 C50 1 阳性结果 =13/40(32.5%) 不正确 =27/40(67.5%) 2 阳性结果 （14-26）/40（35%-65%） 正确 阳性结果 重复性检测总次数 次数 百分比 真正百分比 样本的实际浓度 20 10 50% 30%-70% C30-C70 40 20 50% 35%-65% 100 50 50% 40%-60% 不同C50重复检测次数与检出阳性数的关系 临界点（CUT-OFF）的重复性指的是什么？ 是为正在评价的检测试剂或系统建立分析物的临界浓度(C50)，并且确保临界浓度±20%的范围处于95%区间内。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 如何获得系统或试剂的“临界点” 检测试剂或系统的说明书可能会注明分析物的临界浓度。 如果临界浓度未知，则可以将阳性样本进行一系列稀释，然后将他们进行重复检测以确定能够获得50%阳性和50%阴性结果的那个稀释度。这一稀释度的分析物浓度即为临界点。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline (2) 测定下限的验证 处于测定下限浓度（如临界点浓度+20%）的样本，重复检测20次，应至少有18次以上(90%)为阳性反应。 重复性验证的质量控制 质控品：如方法学比较在10天内完成，则每一批次都要进行质控样本检测，如出现失控，则当次检测结果无效。安排重新检测以替换不合格的批次。实验室要分析失控的原因。不合格批次在10天内不应超过1次或20天内不超过两次。如若超出，所在实验室应中止检测工作并咨询试剂制造商以确定原因并采取纠正措施。 得出20次重复检测结果。如果方法比较研究超过20天，则每一批次对每份对照样本进行单次检测，总计也提供20次结果。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 6.其他（1）同一项目不同检测方法或仪器的比对 适用范围:一个项目有两种以上的方法或者两台以上的仪器(包括同一型号的仪器)同时检测,需要进行一致性比对。 （注：定量检测中,报告单位不同的不需要比对） 首次比对选取40份(20)样本,最好阴阳性各半 ↓ 随机每8份分成一组 ↓ 两种方法(或两台仪器)每天平行检测一组样本 ↓ 将所有检测结果汇总 ↓ Kappa检验,评价一致性