硒增强细胞免疫的研究——Ⅲ 硒通过增强抗原递呈促进迟发超敏反应.docx

期刊文献 硒增强细胞免疫的研究 Ⅲ。硒通过增强抗原递呈促进迟发超敏反应夏汉章 张友会 （肿瘤研究所，北京） 提要 硒处理小鼠能提高小鼠对致敏剂三硝基氯苯（ TNCB）诱发的迟发超敏反应 （DTH）的敏感性。体外实验证明，经硒处理的小鼠脾脏粘附细胞向TNCB 致敏的 T 淋巴细胞递呈半抗原三硝基苯基进而刺激 T 细胞增殖反应的能力。即抗原递呈功能比未处理的对照强。正常小鼠的脾脏粘附细胞在体外经硒处理后，其递呈抗原的能力更强。提示硒通过加强抗原递呈细胞的功能实现促进 DTH 反应。 关键词 迟发超敏反应 抗原递呈 硒 自然界硒分布和机体血硒含量与人类某些肿瘤的发生率成负相关关系[1]，硒可抑制某些 化学致癌物的致癌效应[2]。免疫系统的功能与硒的含量相关，多数研究表明，硒可促进机体的体液免疫反应[3，4]，但有关硒对细胞免疫之影响的报道为数不多。Spallholz[5]曾报道硒处理豚鼠可提高动物对二硝基氯苯（DNCB）刺激的迟发超敏反应的敏感性。硒不仅能促进T 细胞的功能，如细胞毒T 细胞的活性[6]、白细胞介素 2 的分泌[7]，也能促进巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤效应[8]，消除抑制性巨噬细胞的抑制功能[9]。本文报道硒通过增强抗原递呈细胞 活性从而加强小鼠的迟发超敏反应。 材料与方法 动物 健康 BALB/c 小鼠，2-3 月龄，由中国医学科学院动物中心或肿瘤研究所动物室提供。 试剂 RPMI1640（GIBCO）培养液含青霉素 100u/ml，链霉素 100u/ml，小牛血清 10%。临用时加新配制的 2-巯基乙醇（Sigma）5×10-5mol/L。致敏剂 1，3，5-三硝基氯苯（TNBS， Sigma），用磷酸缓冲液（PBS）配成 10mmol/L 的溶液，并用 1NnaOH 调酸碱度至 pH7.4， -20℃保存。亚硒酸钠（ Na2SeO3）购于北京化工厂。氚 -胸腺嘧啶核苷（ 3H-TdR，比活性 25Ci/mmol），购于中国科学院原子能研究所。 迟发超敏反应 取 0.2ml 7%TNCB，涂在剪除毛发的小鼠腹部皮肤上，使动物致敏。4d 后，在动物左耳壳涂 1%TNCB 刺激。24h 后测量动物左右耳壳的厚度差，来表示迟发超敏反应的强度。对照为未致敏小鼠耳壳厚度差。 抗原特异性 T 淋巴细胞增殖反应 半抗原三硝基苯基（TNP）刺激的 T 细胞增殖反应的实验方法见文献[10]。用液闪仪（Beckman）测量样品每分钟脉冲数(cpm)。结果用三个重 复孔 cpm 的均值表达。 25SAC 25 SAC SAC-TNP 20 15 10 5 0 0 0.5 5 50 500 图 2 亚硒酸钠对 TNP 特异性增殖反应影 响的剂量效应关系 Fig 2 Dose-dependent effect of selenium on TNP-specific proliferative response 4×103 LNT were stimulated by SAC or SAC-TNP in the prosence of various doses of sodium selenite for thrce days,LNT proliferative response was mensured by 3H-TdR incorporation 图 1 示硒对迟发超敏反应（DTH）的影响。以未致敏的小鼠对三硝基氯苯（TNCB）的刺激为对照，四天前经 TNCB 致敏的小鼠能对 TNCB 的再刺激产生较强的 DTH 反应。如果在致敏的同时经腹腔注射 Na SeO (1mg/kg)，小鼠对 TNCB 刺激的 DTH 反应明显增强，提 2 3 示硒提高了动物对致敏剂的敏感性。 图 2 示硒对抗原特异性 T 淋巴细胞增殖反应的影响。结合半抗原三硝基苯基（TNP） 的小鼠脾脏粘附细胞（SAC）能刺激 TNCB 致敏小鼠的淋巴结 T 细胞（LNT）活化，产生强烈的增殖反应，而未结合TNP 的SAC 只引起LNT 轻度增殖。此外如前文所述[10]，SAC-TNP不能刺激 TNCB 非致敏的 LNT 产生增殖反应，而结合TNP 的脾脏非粘附细胞（SNAC）也只能刺激 LNT 产生微弱的增殖反应。提示 SAC 在该实验系统中实际起着递呈抗原的作用。 ) )m m1 60 0.0 50 × (tn 40 em 30 ni 20 ra 10 E 6 Na2SeO3 treniment Sensitlzition — — — 7%TNCB 1mg/kg 7%TNCB Challengc 1%TNCB 1%TNCB 1%TNCB 图 1 TNCB 诱导的迟发超敏反应Fig 1 Delayed type hypersensiti