临床免疫学检验：第10章 生物素-亲和素放大技术.pptVIP

第十章 生物素-亲合素放大技术 《临床免疫学检验》 第十章 生物素-亲和素放大技术 (Chapter 10 Biotin-Avidin Immune Amplification Technique) 《临床免疫学检验》 第十章 生物素-亲和素放大技术 生物素-亲和素系统（biotin-avidin system）：是基于生物素和亲和素既能偶联抗原/抗体分子，又能偶联酶、荧光素等示踪物质。 BAS具有特异、敏感、稳定、灵活等多种优势，其高亲和力和多级放大效应，赋予传统标记免疫分析更高的检测敏感度。 第一节 生物素-亲和素系统 (Section 1 Biotin-Avidin System) 一、组成 常从含量较高的卵黄和肝组织中提取； 又称维生素H； Ⅰ环为咪唑酮环，结合亲和素； Ⅱ环为噻吩环，戊酸侧链末端羧基标记抗体或其他分子。 1．生物素（B） 一、组成 1．生物素（B） 第一节 生物素-亲和素系统 一、组成 又称抗生物素蛋白，常从卵白蛋白中提取； 由4个相同亚基组成的四聚体，可结合4个亲和素分子的Ⅰ环； pH9~13中性质稳定、耐热、耐多种蛋白水解酶作用； 链霉亲和素属弱酸性蛋白，分子结构中不含任何糖基，与固相材料、组织细胞基质非特异结合较低。 2．亲合素（A） 第一节 生物素-亲和素系统 二、特点 极高的亲合力而呈现高度特异性和稳定性，明显降低或避免了非特异性结合。 1．高特异性 第一节 生物素-亲和素系统 二、特点 1．高特异性 2．高敏感性 1:4 生物素化形成许多“触手”的多价制剂，使整个反应体系出现多级放大效应，赋予检测系统极高的敏感性。 第一节 生物素-亲和素系统 二、特点 1．高特异性 2．高敏感性 3．强稳定性 高亲合力，解离常数很小，呈不可逆反应； 酸、碱、变性剂、蛋白水解酶等不影响其结合； 稳定性强，干扰因素少，提高检测的精密度。 第一节 生物素-亲和素系统 二、特点 1．高特异性 2．高敏感性 3．强稳定性 4．强实用性 可与多种示踪物质联合，用于多种生物学反应体系； 高工作效价，可降低抗体用量，节约成本； 生物素化标记物稳定性好，有效期长。 第一节 生物素-亲和素系统 第二节 生物素-亲和素系统的应用 (Section 2 Application of Biotin-Avidin System) 一、应用于固相载体的包被环节 第二节 生物素-亲和素系统的应用 二、应用于检测系统的信号放大 （一）生物素-亲合素-生物素模式（BAB） ABC-ELISA检测原理示意图 第二节 生物素-亲和素系统的应用 二、应用于检测系统的信号放大 （二）生物素-亲合素模式（BA） LAB-ELISA检测原理示意图 化学发光免疫测定的临床应用 灵敏度高，特异性强； 线性范围宽； 标记物稳定，试剂有效期长； 自动化程度高，检测菜单齐全。 思考题 1．生物素和亲合素分子结构特点是什么？ 2．BAS的作用特点是什么？ 3．简述BAS在标记免疫技术中的应用。 下次内容：第十一、十二章 第十章 生物素-亲合素放大技术 《临床免疫学检验》