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第四节 自动化酶联免疫分析系统 二、仪器评价 自动化、结果准确、工作效率高 连体机和分体机 总结 掌握免疫检验自动化的特点 掌握免疫浊度分析的分类和各自原理、特点 了解免疫比浊分析的影响因素 了解酶联免疫分析系统的组成及性能 第十八章 免疫自动化仪器分析及应用 《临床免疫学检验》 第十八章 免疫自动化仪器分析及应用(Chapter 17 automation of immunoassays and its application) 《临床免疫学检验》 第十八章 免疫自动化仪器分析及应用 第一节 自动化免疫浊度分析系统 第二节 自动化化学发光分析系统 第三节 自动化荧光免疫分析系统 第四节 自动化酶联免疫分析系统 第五节 免疫自动化仪器分析选择与应用 第一节 自动化免疫浊度分析系统 免疫检验自动化(automation of immunoassays) 是将免疫检验过程中的取样、加试剂、混合、温育、固相载体分离、信号检测、数据处理、结果报告和检测后的仪器清洗等步骤由计算机控制,仪器自动完成整个免疫检验过程。 优点 减轻了劳动强度 缩短了分析流程 提高了试验结果的精确度和准确度 第一节 自动化免疫浊度分析系统 免疫比浊法 透射免疫比浊法 (turbidimetric immunoassay) 散射免疫比浊法 (nephelometry immunoassay) 速率散射比浊法 定时散射比浊法 第一节 自动化免疫浊度分析系统 一、免疫透射比浊法 原理 液相沉淀反应 比浊剂 抗体过量 吸光度与抗原量呈正比 波长:340nm 第一节 自动化免疫浊度分析系统 一、免疫透射比浊法 原理 仪器工作过程 ① 试剂区 ② 试剂针 ③ 样本区和稀释液 ④ 加样针 ⑤ 反应区 ⑥ 清洗工作站 1 2 4 3 6 5 1 2 4 3 6 5 第一节 自动化免疫浊度分析系统 一、免疫透射比浊法 原理 仪器工作过程 方法评价 灵敏度较好 抗体用量较大 免疫复合物要足够大,足够多 耗时长 第一节 自动化免疫浊度分析系统 二、免疫胶乳比浊法 原理 第一节 自动化免疫浊度分析系统 二、免疫胶乳比浊法 原理 方法评价 灵敏度提高 类风湿因子的测定会出现非特异性凝集 免疫胶乳轻度自凝或抗体活性降低 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 原理 散射光强度与颗粒的分子量、数目、大小及入射光强度呈正比;与微粒至检测器的距离、入射光波长呈反比。 Iθ= I0[4π2(dn/dc) 2 Mc(1+cosθ)] Nγ2λ4 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 原理 散射光强度与颗粒的分子量、数目、大小及入射光强度呈正比;与微粒至检测器的距离、入射光波长呈反比。 不同大小微粒形成的散射光分布不同,选用适当的角度测量散射光强度。 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 原理 颗粒直径1/10λ Rayleigh 散射 1/10λ颗粒直径≤λ Debye 散射 颗粒直径≥λ Mile 散射 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 定时散射比浊法 预反应阶段:避开抗原抗体反应的不稳定阶段(7.5-120秒) 反应阶段:在抗原抗体反应的最佳阶段读数(2-6min) 抗原过量检测 抗体过量 抗原过量阈值限定 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 定时散射比浊法 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 速率散射比浊法 速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 速率散射比浊法 原理 速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。 速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。 速率峰与抗原浓度呈正相关 抗原浓度-速率峰反应曲线 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 速率散射比浊法 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 速率散射比浊法 原理 速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。 速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。 速率峰与抗原浓度呈正相关 抗原浓度-速率峰反应曲线 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 速率散射比浊法 原理 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比浊法 速率散射比浊法 原理 速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。 速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。 速率峰与抗原浓度呈正相关 抗原浓度-速率峰反应曲线 抗原过量检测 第一节 自动化免疫浊度分析系统 三、免疫散射比
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