临床免疫学检验：第17章 补体检测及应用.pptVIP

第十七章 补体检测及应用 《临床免疫学检验》 第十七章 补体检测及应用 (Chapter 17 Detection of complement and its application) 《临床免疫学检验》 第十七章 补体检测及应用 第一节 补体的生物学特性及功能 第二节 血清总补体活性测定 第三节 补体结合试验 第四节 单个补体成分测定 第五节 补体测定的临床应用 第一节 补体的生物学特性及功能 一、补体的理化性质 补体是存在于人和动物血清、组织液及某些细胞膜上的 一组经激活后具有酶活性的蛋白质 理化性质 合成 化学组成 含量 易灭活 第一节 补体的生物学特性及功能 二、补体的激活 第一节 补体的生物学特性及功能 三、补体的生物学功能 溶解细胞、细菌和病毒 调理作用 清除免疫复合物 第一节 补体的生物学特性及功能 三、补体的生物学功能 溶解细胞、细菌和病毒 调理作用 清除免疫复合物 介导炎症反应 免疫调节作用 第二节 血清总补体活性测定 一、CH50测定原理 CH50(50% complement hemolysis): 50%溶血 引起50%溶血所需要的最小补体量为一个CH50单位 第二节 血清总补体活性测定 二、CH50测定方法要点及结果判定 调制绵羊红细胞悬液 2%SRBC, 无溶血 溶血素 2U 缓冲液 pH7.2-7.4磷酸盐缓冲液或巴比妥缓冲液 配置50%溶血标准管 100%溶血管: 2%SRBC 0.5ml+蒸馏水 2.0ml 50%溶血标准管:100%溶血管+蒸馏水 2.5ml 正式试验 第二节 血清总补体活性测定 二、CH50测定方法要点及结果判定 管号 1:20稀释血清 缓冲液 溶血素 2%SRBC 50%溶血总补体值（U/ml） 1 0.10 1.40 0.50 0.50 200 2 0.15 1.35 0.50 0.50 133 3 0.20 1.30 0.50 0.50 100 4 0.25 1.25 0.50 0.50 80 5 0.30 1.20 0.50 0.50 66.5 6 0.35 1.15 0.50 0.50 57.1 7 0.40 1.10 0.50 0.50 50 8 0.45 1.05 0.50 0.50 44.4 9 0.50 1.00 0.50 0.50 40 10 0.00 1.50 0.50 0.50 不溶血 第二节 血清总补体活性测定 二、CH50测定方法要点及结果判定 调制绵羊红细胞悬液 溶血素 缓冲液 配置50%溶血标准管 正式试验 50%溶血总补体活性的计算 CH50(U/ml)=(1/终点管稀释血清的用量)×血清稀释度 第二节 血清总补体活性测定 三、方法评价和临床意义 优点 简便, 快速 缺点 敏感度低, 重复性差 临床意义 补体的缺陷 自身免疫病 肝脏疾病或营养不良 第三节 补体结合试验 一、试验原理 反应系统 已知抗原(或抗体), 待测抗体(或抗原) 指示系统 绵羊红细胞, 溶血素 补体系统 新鲜豚鼠血清 第三节 补体结合试验 一、试验原理 反应系统 已知抗原(或抗体), 待测抗体(或抗原) 指示系统 绵羊红细胞, 溶血素 补体系统 新鲜豚鼠血清 第三节 补体结合试验 二、结果判定 阳性 不溶血 阴性 溶血 华氏反应 第三节 补体结合试验 三、方法评价 优点 敏感度高、特异性强、结果容易观察、可测范围广 缺点 难以标准化 第四节 单个补体成分测定 一、免疫溶血法 二、免疫化学法 C3、C4 、C1q 、B因子和C1抑制物 自动化免疫比浊法 第五节 补体测定的临床应用 临床应用 机体免疫系统的功能评价 疾病的诊断与治疗 流行病学调查 HLA分型的补体依赖性细胞毒试验 (complement-dependent celluar cytotoxicity, CDCC) 总结 掌握CH50测定的原理、方法和结果判定 熟悉补体结合试验的原理 熟悉单个补体的测定方法和补体测定的临床应用 预习: 第十五章 流式细胞仪分析技术与应用 第十八章 免疫自动化仪器分析及应用 第十七章 补体检测及应用 《临床免疫学检验》