shRNA` Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移增殖和凋亡影响.docxVIP

shRNA` Slit2对骨肉瘤MG63细胞迁移增殖和凋亡影响 shrna`-slit2对骨肉瘤mg63细胞迁移、增殖和凋亡影响 　　[摘要]目的探討人神经导向因子2（slit2）rna干扰质粒（shrna`-slit2）对骨肉瘤mg63细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法构建shrna`-slit2慢病毒载体，将骨肉瘤mg63细胞随机分为空白对照组、空白载体病毒组、shrna`-slit2载体病毒组。空白对照组骨肉瘤mg63细胞不转染慢病毒，空白载体病毒组细胞转染含空白质粒载体的慢病毒，shrna`-slit2载体病毒组细胞转染含shrna`-slit2质粒载体的慢病毒。分别应用rt`-qpcr、western`-blot方法检测各组slit2、robo4以及凋亡因子caspase`-3和caspase`-9mrna和蛋白的表达，cck`-8试剂盒检测骨肉瘤mg63细胞的增殖，transwell小室实验检测细胞迁移，av`-pi凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况。结果慢病毒转染效率较高，以骨肉瘤mg63细胞为靶点种子细胞，慢病毒转染率为90%。shrna`-slit2载体病毒组slit2、robo4mrna和蛋白相对表达量均明显低于空白载体病毒组，凋亡因子caspase`-3和caspase`-9的mrna和蛋白相对表达量均明显高于空白载体病毒组，差异有统计学意义（f