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实验十一DNA的粗提取与判断
授课目标
1．初步掌握DNA粗提取和判断的方法。
2．观察提取出来的DNA物质。
实验原理
1．DNA在NaC溶液中的溶解度是随
NaC的浓度变化而改变的。
DNA在0．14mo/L的NaC溶液
中的溶解度最低，据此可使溶解于
NaC溶液中的DNA析出。
2．DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的
DNA。
3．DNA＋二苯胺
开水浴
蓝色（用于DNA的判断）
实验步骤
1．资料制备
m柠檬酸钠100m
活鸡血180m
500m烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min
离心2min→吸去上清液→
即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯置于冰箱中，静置一天使鸡血
细胞自行积淀）
2．方法步骤
取血细胞液5-10m＋20m蒸馏水，玻璃棒沿一个方向迅速搅拌
（1）提取血细胞核物质纱布过滤，滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质
原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒迅速搅拌机械加快血细胞破碎
2）溶解核内DNA：滤液＋2mo/LNaC溶液40m，玻璃棒沿一个方向搅拌
3）析出含DNA的黏稠物：向上述溶液中慢慢加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现
丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaC溶液相当于稀释到0．14mo/L）
4）滤取含DNA的黏稠物：用多层纱布过滤，含DNA的黏稠物留在纱布上
5）DNA黏稠物再溶解：20m2mo/LNaC溶液50m烧杯，
上述黏稠物缓慢搅拌
（6）过滤含DNA的2mo/LNaC溶液：用2层纱布过滤，滤液中含
3min
DNA
7）提取含杂质较少的DNA：上述溶液＋95%酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝装物卷起。
8）DNA判断：
实验要点：
本实验成功的要点是获得较纯净的DNA，因此应注意：
1．充分搅拌鸡血细胞液。DNA存在于鸡血细胞核中。将鸡血细胞与蒸馏水混淆此后，应用
玻璃棒沿一个方向迅速搅拌，使血细胞加快破碎，并释放出DNA
2．积淀DNA必定用冷酒精。实验前必定准备好大量95%的酒精，并在冰箱中（5℃以下）最少
寄存24小时。
3．正确搅拌含有悬浮物的溶液。在第（3）、（5）步骤，玻璃棒不要直插烧杯底部，且搅拌要
轻缓，以便获得较完满的DNA分子。在步骤（7），要将玻璃棒插
入烧杯溶液中间，用手缓慢转动5-10min。
【同类题库】
．在“DNA的粗提取与判断”的实验中分别使用2mo／L、0．14mo／L、2mo／L、0015mo／L的
氯化钠溶液，其作用分别是（A）
A．溶解、析出、溶解、溶解C．溶解、溶解、析出、溶解
B．析出、溶解、析出、溶解D．溶解、析出、溶解、析出
．以以下图示中能反应DNA溶解度与NaCI溶液浓度之间关系的是（C）
．DNA在以下哪一种浓度的NaC溶液中溶解度最低（B）
A．2．00mo/L
B．0．14mo/L
C
．0．015mo/LD
．0．10mo/L
．在DNA的粗提取过程中，初步析出
DNA和提取较纯净的
DNA所用的药品的浓度和名称分别
是（B）
①0．1g/m的柠檬酸钠溶液
②2．00mo/L的NaC溶液
③0．14mo/L的NaC溶液
④
体积分数为95%的酒精溶液
⑤0．015mo/L的NaC溶液
⑥0．04mo/L的NaC溶液
A．①③⑤
B．③④
C
．②④
D
．②③④
．与析出DNA黏稠物有关的表达，不正确的选项是（
C）
A．操作时慢慢滴加蒸馏水，降低
DNA的溶解度
B．在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证
DNA分子完满
C．加蒸馏水可同时降低
DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出
D．当丝状黏稠物不再增加时，此时
NaC的浓度约为L
．（多项选择）以下有关“
DNA粗提取”的操作中，正确的选项是（
ABCD）
A．在鸡血细胞液中加入蒸馏水
B．在“析出DNA黏稠物”时，要慢慢加入蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增加
C．在用酒精凝聚DNA时，要使用冷酒精
D．用玻璃棒搅拌时要沿一个方向
．“DNA的粗提取与判断实验”中有三次过滤：
1）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液。
2）过滤含黏稠物的LNaC
3）过滤溶解有DNA的2mo/LNaC
以上三次过滤分别为了获得（A）
A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
B．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液C．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布中DNAD．含较纯的DNA滤液、纱布上黏稠物、含DNA的滤液
．为获得较纯净的DNA，采集来的血样可用蛋白酶办理，此后用有机溶剂除掉蛋白质。以下有关表达，正确的选项是（D）
A．除掉血浆中的蛋白质B．除掉染色体上的蛋白质
C．除掉血细胞表面的蛋白质D．除掉血细胞中所有的蛋白质
．在“DNA的粗提取与判断实验”中，和“使用蛋白酶从染色体中
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