【医学ppt课件】核酸的化学.pptVIP

分子生物学技术 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第95页。 （三） Southern印迹法 分子生物学技术 用于检测DNA 方法：如图 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第96页。 Northern 印迹法：用于检测RNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第97页。 （四）聚合酶链  式反应（polymeerase chain reaction, PCR) 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第98页。 聚合酶链式反应（PCR） 每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍 30轮循环可获得—— 230（1.07×109)个基因片段 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第99页。 应用： 广泛用于克隆、测序、产生特异突变、医学诊断和法医. 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第100页。 原理： 碱基配对； 聚合酶可催化在试管内合成与模板互补的 DNA新链； 双脱氧核苷酸无3’-OH，合成到此终止； 可电泳分离随机得到的大小不等的片段。 （五）核酸序列测定 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第101页。 核酸序列测定 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第102页。 * * 1、tRNA 约占全部RNA的 15%；由70-90个核 苷酸组成许多种类； 沉降系数4S。 RNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第63页。 1）tRNA结构： 一级结构多已清楚， 含较多稀有碱基； 二级结构为三叶草 有：aa臂、 二氢嘧啶环、 反密码环、 可变环、 TΨ 环 P198 RNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第64页。 主要特征： 1.四臂四环； 2.氨基酸臂3′端有CCAOH的共有结构；3.D环上有二氢尿嘧啶（D）； 4.反密码环上的反密码子与mRNA相互作用；5.可变环上的核苷酸数目可以变动； 6.TψC环含有T和ψ；7.含有修饰碱基和不变核苷酸。 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第65页。 tRNA 三级结构 为倒L型 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第66页。 A、在pr合成中转运aa； B、在pr合成的起始、DNA反转录合成及其它代谢调节中起作用。 2）tRNA功能： 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第67页。 2、mRNA和hnRNA 1）合成： 以DNA为模板(核内) 合成 hnRNA（含内含子和外显子） 加工 成熟的mRNA 入细胞质 蛋白质合成 RNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第68页。 合成mRNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第69页。 切除内含子 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第70页。 2) mRNA结构特点： 3‘末端有polyA结构：与mRNA从核入质有关。 5‘末端有帽子结构：G被甲基化，此可能与pro合成的起始有关。 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第71页。 3) 功能：是蛋白质合成的模板 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第72页。 3、rRNA 1)占RNA总量的80%，是构成核糖体的骨架。 2)核糖体功能： pr合成的部位. 3）结构：分大、小亚基 一、二级结构多已确定，但功能不清。 RNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第73页。 原核细胞：70S核糖体； 真核细胞：80S核糖体； 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第74页。 核糖体RNA自我剪切 1983年在四 膜虫中发现 RNA有催化功能 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第75页。 4、RNA的功能 1）在DNA复制、转录、翻译中起重要调控 作用； 2）有催化作用； 3）可作为遗传物质（如逆转录病毒）。 RNA 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第76页。 【医学ppt课件】核酸的化学全文共102页，当前为第77页。 五、核酸的性质 （一）一般理化性质 1、两性电解质：