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6.2.2 植物群落监测法 森林群落呼吸速率的测定 (1)灌草本层呼吸速率的测定:同草地和农田群落呼吸速率的测定。 (2)乔木层呼吸速率的测定:白天在每次每样本光合速率测定完后,需立即测定一次呼吸作用。白天呼吸速率的测定是在同化箱外罩一块黑红布,目的是使测试样品脱离光源,而在晚上则无需布罩 (3)群落呼吸速率的计算:利用各个时间段内的呼吸速率Rj,可以计算群落的平均呼吸速率(R) 6.3 细菌检验监测技术 细菌总数法是细菌学检验法的一种主要方法。它是指1mL水样在营养琼脂培养基上,于37℃经24h培养后所生长的细菌茵落的总数 细菌总数是检验一般水域污染的标志 6.3.1 细菌总数的监测技术 测定细菌总数的主要程序: 1. 灭菌 (1)于热灭菌:将试管、平皿、吸管等玻璃仪器,装入于热灭菌箱中160℃灭菌2h (2)高压蒸汽灭菌:稀释水、培养基、采样瓶等置于高压蒸汽灭菌中,经115℃(10磅/in2)高压蒸汽灭菌20min。 (4)蒸汽灭菌:采用蒸汽灭菌器,在100℃常压下,每次定时灭菌。 (5)火焰灭菌:此法灭菌时应用远火徐徐加热.然后再于火焰焰心灼烧为妥 2.营养琼脂培养基的制备:称取108蛋白胨、3g牛肉膏、5g氯化钠及10一20g琼脂溶于1000m1蒸馏水中,加热至琼脂溶解,调节PH为7.4—7.6过滤,分装于玻璃容器中,经高压蒸汽灭菌20min,贮于冷暗处备用 6.3.1 细菌总数的监测技术 3.试样培养 (1)取定量混合均匀的水样(或稀释后水样)注入灭菌平皿中,倾入15ml已融化并冷至45℃左右的营养琼脂培养基,旋摇平皿使其混合均匀。应做两份实验。 (2)待平皿上试样凝固后,将平皿倒置于恒温箱中37℃培养24h,然后进行菌落计数。 (3)用营养琼脂培养基同时进行空白对照实验 4. 菌落计数:作平皿菌落计数时,可用眼观察,也可用放大镜观察,求出1ml水中的干均菌落数。进行稀释水样计数时,应采用平皿内有30一300个苗落的稀释度进行计算 6.3.2 大肠杆菌的监测技术 大肠杆菌(Eshllus coli)是指示粪便污染的重要指示生物 在大肠菌群系一群需氧又兼性厌氧的,在37℃生长时能使乳糖发酵,在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。大肠苗群数指每升水样中所含有的大肠菌群的数目 大肠菌群检验方法有发酵法和滤膜法 6.3.2 大肠杆菌的监测技术 1. 发酵法 这是根据大肠菌群使乳糖发酵产生酸和气的特性而进行检验,如产破产气者,大肠菌群则为阳性 培养基的种类: (1)乳精蛋白胨培养液; (2)三倍浓缩乳糖蛋白陈培养液; (3)品红亚硫酸钠培养基(供发酵用) (4)伊红美蓝培养基 6.3.2 大肠杆菌的监测技术 检验大肠菌群主要程序 初步发酵试验:初步发酵试验在灭菌操作条件下,取定量水样加入3倍浓缩乳糖蛋白陈培养液中,于37℃恒温培养24h 平板分离:经24h培养后,将产破产气及只产酸的发酵管,分别接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基上,再恒温培养24h,然后分别选择菌落 复发酵试验:上述涂片镜检茵落如为革兰氏阴性无芽脑杆菌,可进一步挑取该菌落的另一部分接种于乳糖蛋白胨培养液中,于37℃恒温培养24h,有产酸产气者,即证实有大肠茵群存在 大肠菌群计数:根据以上试验证实有大肠茵群存在的阳性管数,查大肠苗群检数表,报告每升水样中大肠菌群数 6.3.2 大肠杆菌的监测技术 2. 滤膜法 滤膜是采用一种微孔薄膜,按灭菌操作将水样注入具有滤膜的过滤器中,经抽滤,细菌被截国在膜上,后将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上,进行恒温培养16—18h,符合上法所述特征的菌落进行涂片,革兰氏染色,镜检 凡属革兰氏染色阴性,无芽胞杆菌者,再接种于乳糖蛋白胨培养18h产酸产气者,判断为大肠菌群阳性 1L水样中大肠菌群数等于滤膜上生长的大肠菌群落总数乘以3 6.4生物毒性试验监测技术 6.4.1 水生生物急性毒性试验 水生生物急性毒性试验(acute toxicity test for aquatic organism)是测定高浓度污染物在短时期(一船不超过几天)内对水生生物所产生的急性毒性作用,用以评价污染物毒性的实验方法 通过水生生物急性毒住试验可以确定半数存活浓度(TLm)或半数致死浓度(TL50).并用来评价污染物的毒性大小和性质。 还可粗略了解毒物引起生物体中毒的症状和特点,以判断毒物的毒性强弱和水环境的污染程度,并为制定在环境中的毒物最大容许浓度提供基本数据 生物监测技术 6. 生物监测技术 生物监测技术是用生物评价技术和方法对环境中某一生物系统的质量和状况进行测定,它可以弥补理化监测不足,配合物理化学监测,或者成为综合的环境监测手段 特点: 生物监测所反映的是自然的和综合的污染状况 生物可以选择性地富集某些污染物可以作为早期污
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