实验六PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测-教案.pdfVIP

学习好资料 欢迎下载 授课教师 常祖明 学生人数 55 课 题 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 授课类型 新授课 授课方法 讲授、演示 教学用具 多媒体、实验室设备 教学目的 通过本实验掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学会琼脂糖凝胶电泳的操作技术 教学重点 琼脂糖凝胶的制备及点样操作 教学难点 理解琼脂糖凝胶电泳的原理 教学过程 一、实验目的 1.掌握琼脂糖凝胶电泳的原理 2.学会琼脂糖凝胶的制作和进行电泳的方法 二、实验原理 1.DNA琼脂糖凝胶电泳的原理 琼脂糖是一种线性多糖聚合物，天然聚合长链状分子，在沸水中溶解，45℃开始形成多孔性刚性滤孔， 凝胶孔径的大小取决于琼脂糖的浓度，浓度越高，孔隙越小，其分辨能力就越强。 DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 （1）电荷效应 DNA分子在PH值高于其等电点的溶液中带负电荷，在电泳时向阳极移动。 【等电点】 在某一pH 的溶液中，DNA分子解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，所带净电荷为零，呈电中性， 此时溶液的pH称为该DNA分子的等电点，