南方医大癌生物学讲义16-3肿瘤的合理治疗（下）.docxVIP

第十六章（3）肿瘤的合理治疗（下） 前言：上一节，我们介绍了靶向EGFR和蛋白酶体的抑制剂，今天我们就来介绍靶向另外3个靶点的抑制剂——Smo蛋白、mTOR?和?B-Raf。? Smo拮抗剂 抗肿瘤药物的一个重要潜在来源就是自然界中存在的化合物。植物来源产物环巴胺?(cyclopamin, 西洛帕明）的发现就是一个很好的例子。 这个奇特的故事起始于观察到美国西部高地牧草羊群的小羊有时候出现流行性先天畸形，它们大多数生下来就是死胎。最极端的畸形是独眼——小羊只有一个中间单眼。20 世纪 50 年代开始的兽医研究工作发现，如果怀孕的母羊在怀孕第 14 天吃了假藜芦（藜芦属) 就会产下独眼的新生羊羔。如果在怀孕早期或晚些时候吃了假藜芦就会出现其他的畸形（如腭裂和短腿）。1968 年之前，对假藜芦引起的致畸效应的追踪研究发现了一种后来称为环巴胺的生物碱, 它能在多数有机体中诱导独眼畸形。 图1：假藜芦引起的胚胎畸形 许多这类畸形与人类中称为前脑无裂畸形的疾病相似，人类这种畸形胎儿是由于?PTCH (patched)?受体基因或编码其配体的?SHH (sonic hedgehog) 基因发生遗传种系突变引起的。目前已经发现了23种SHH突变和3种PTC突变与这一情况有关。这些发现第一次提示环巴胺这一强烈的致畸药物能够干扰Hedgehog 激活的信号通路。 在这个信号通路中，Gli转录因子的前体通常在胞质中被裂解，分解后的一个片段入核发挥转录抑制因子的作用。质膜定位蛋白Smo(Smoothened)能保护Gli转录因子前体蛋白免受裂解，但这一作用通常被质膜中Ptc受体蛋白通过尚不清楚的机制所抑制。然而，当Hh(Hedgehog)配体与 Ptc 结合后，Ptc失去抑制 Smo 蛋白的作用。Smo 则进入初级纤毛蛋白保护Gli蛋白免受正常情况下发生的裂解。完整的Gli能从初级纤毛运动到核内作为锌指结构转录因子诱导基因表达。Hedgehog结合Patched后产生的效应可以用突变的方法造成Ptc功能缺失或Smo功能获得来模拟，这些基因突变在皮肤基底细胞癌中很常见。 图2：Patched-Smoothened 信号通路 在皮肤基底细胞痣综合征(BCNS)中检测到 Patched 编码基因存在胚系突变。皮肤细胞PTCH基因座杂合性缺失(LOH) 会使痣朝着基底细胞癌(BCC)演变。此外，基底细胞癌是最常见的UV照射导致的皮肤肿瘤，近半数散发性基底细胞癌存在PTCH基因失活突变或SMO基因的激活突变。不过幸运的是，这些皮肤癌相对预后较好和容易治疗。但是这两个基因存在等位基因突变的其他肿瘤，尤其是肌细胞和小脑来源的肿瘤(成神经管细胞瘤) 则不是这样。 2000年研究者发现环巴胺能直接抑制Smo蛋白, 而且这种相互作用阻滞了Hh过度表达或SMO基因突变所造成的异常信号转导。这表明环巴胺的致畸效应是直接由胚胎发育期阻滞Hh信号通路的重要环节而导致的。 环巴胺与Smo相关性的发现随后引发了用环巴胺治疗多种Hh阳性的人类肿瘤细胞系的尝试，其对肿瘤细胞增殖的抑制程度达到75%~95%。例如，体外培养的人成神经管细胞瘤细胞具有较强的Hedgehog信号通路活性，能对环巴胺产生显著的治疗反应，导致细胞生长停止并快速失去活性；而另外两种 Hedgehog 未激活的脑肿瘤细胞（胶质母细胞瘤和室管膜瘤）中环巴胺未能产生治疗反应。环巴胺对其他无Hedgehog信号通路激活的肿瘤细胞系也不能产生治疗作用。另外，环巴胺能彻底阻滞胆囊肿瘤（另一种分泌Hedgehog的内胚层肿瘤）细胞在小鼠模型中的肿瘤形成能力。大约 70%人胰腺癌存在高水平的Hh表达，表明Hh-Smo-Ptc-Gli信号通路的活化是这些肿瘤生长程序的内在部分。 图3：环巴胺的治疗效果 成年鼠长时间应用治疗剂量的环巴胺至今没有任何毒性作用的表现。然而，有3个主要问题动摇了环巴胺作为有效抗肿瘤治疗候选药物的潜力。首先，与其他天然产物相类似 ，环巴胺是一系列复杂酶反应的最终产物，这一复杂的酶反应过程很难通过有机合成化学实验来实现。其次，要从假藜芦中得到足够大量的产物是不实际的。最后，尽管已经在小鼠体内得到了以上结果，但是在人体内环巴胺仍然产生了过高的毒性作用。因此，在环巴胺的基础上研发了无毒性但具有类似环巴胺阻断Hh信号通路能力的 Smo 拮抗剂，而且这些药物对其他细胞受体的影响很小。 Hh信号对胰腺癌进展具有非常多元的作用。一般来说，在许多肿瘤中，自分泌Hh驱动肿瘤进展，因为这类肿瘤细胞分泌Hh配体同时表达Patched受体，此情况已在胰腺癌基因工程小鼠模型中确证，然而，旁分泌Hh信号在这些肿瘤的进展中具有更重要的作用。胰腺癌细胞释放能刺激肿瘤微环境中成纤维细胞和肌成纤维细胞增殖的Sonic Hh, 胰腺癌特征之一就