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(一)单纯固定液
甲醛:
1.浓度:40%,气体
2.渗透力强,固定均匀,组织收缩小,
3.不能使白蛋白和核蛋白沉淀
4.保存脂类,必须用冷冻切片。是糖的保护剂
5.可固定高尔基体,线粒体
重铬酸钾
1. 浓度:1%-3%水溶液,有毒,橘红色结晶
2. 穿透速度快,几乎不收缩,经乙醇脱水后明显收缩,
3. 未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀,但可使蛋白质变为脂溶剂。
酸化后可使蛋白质沉淀,此时染色体可被保存,但线粒体破坏。
4. 固定高尔基体和线粒体有良好效果。
5. 酸性染料着色好,碱性染料着色差
6. 固定的组织需经流水冲洗 12-24h,或用亚硫酸盐洗涤。
苦味酸
1. 黄色结晶体,是一种强酸,易燃易爆,配成饱和溶液储藏
2. 穿透慢,组织收缩明显,无明显硬化。
3. 能沉淀一切蛋白质
4.对脂肪和类脂无固定作用。
5. 可软化皮肤和火棉胶,不宜用火棉胶包埋
6. 固定时间不宜超过 24h,
7. 固定的组织应尽快放入 70%乙醇,滴加饱和碳酸锂或浓氨水,有助于除去苦
味酸固定产生的黄色。
升汞
1. 浓度为 5%-7%的水溶液,针状结晶
2.穿透力低,只宜固定薄片组织,单独应用组织收缩明显
3, 对蛋白质有固定作用,
4. 对类脂和糖类无固定作用
5. 临用时加冰醋酸
醋酸
1. 刺激性气味的无色液体,低于 15℃为冰醋酸
5%的醋酸 PH 为 2-8,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶。
2. 穿透力强
3 不能沉淀白蛋白,球蛋白,但能沉淀核蛋白
4 不能固定脂肪和内酯,不能保存糖
5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸,可较好的保存染色体
6, 缺点是组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白
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铬酸
1. 为三氧化铬的水溶液,浓度%-1%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合
2 穿透力弱,一般组织需固定 12-24h,固定的组织有收缩,
3 能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好。
4 对脂肪无固定作用
5 固定线粒体和高尔基复合体
6. 宜避光保存,以防蛋白质溶解。
7. 必须彻底流水冲洗(≥24h)。
锇酸(四氧化锇)
1.淡黄色结晶,剧毒,浓度 1%-2%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合
2. 渗透力极弱,易使组织变硬,延长固定时间,组织的脆性增加,对染色不利。
3. 固定均匀,不沉淀蛋白质。
4.为脂类固定剂
5. 适用于线粒体和内质网的固定
6. 为电镜研究的必须固定剂。
7. 固定目的不同,配方和浓度根据需要改变
8. 固定后对碱性染料亲和力强,细胞核的染色效果好
9. 应在临用前前几天配制以保证充分溶解。
丙酮
1.易挥发,易燃的无色液体,可与水,醇,氯仿,醚混合
2. 渗透力强,对核的固定差
3. 可使蛋白质沉淀
4. 作用基本与乙醇相同,但对糖原无固定作用
5.广泛用于酶组织化学中各种酶的固定
乙醇
1. 无色液体,,还原剂,可与水无限相溶,有固定兼脱水作用
用于固定的浓度为80%-95%
2.渗透力弱,固定速度较慢,易使组织变脆,无水乙醇固定时,穿透速度快,
渗透力差,使组织收缩
3.,能沉淀白蛋白,球蛋白,核蛋白
4. 用于糖原的固定
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