CDK5RAP3在不同性别小鼠CCl4急性肝损伤中作用的初步研究.pdfVIP

CDK5RAP3在不同性别小鼠CCl 急性肝损伤中作用 4 的初步研究 中文摘要 acute liver injury ALI 急性肝损伤 （ ， ）通常是由肝炎病毒、药物过量和化学 毒素引起。持续的肝损伤最终可导致肝功能障碍甚至死亡，对人体具有严重危害。 carbon tetrachloride CCl ) 四氯化碳 （ ， 4 是一种常见的化学毒素，其诱导的急性肝 CCl 损伤模型是模拟人类肝脏疾病的经典模型之一。 被肝脏吸收后，对肝细胞的 4 细胞膜结构与功能造成损害。周期素依赖性激酶5 激活结合蛋白3 （cyclin dependent kinase5regulatory subunit associatedprotein 3 CDK5RAP3 UFM1 ， ）是 系统的一种底物适配器，在物种间高度保守，哺乳动物各个器官中均有表达，其 中肝脏中表达量最高；CDK5RAP3 通过控制肝细胞增殖和分化、糖脂代谢、 ufmylation ER 和内质网（ ）稳态，在哺乳动物肝脏发育和肝功能中发挥关键作用。 15% CCl 本研究通过对小鼠腹腔注射 的 4 油溶液获得经典的急性肝损伤模型，对 照组给与同体积的橄榄油溶液。所有小鼠在注射CCl 24h 后，收集血清，测定 4 五项血清肝功能指标。接着取各组小鼠的同一部位肝脏，并对其进行固定包埋切 - HE TUNEL TrizolRNA 片，用于苏木精 伊红（ ）染色和 染色。剩余部分肝脏加入 提取试剂或RIPA 蛋白裂解液提取总RNA 和总蛋白，用于qRT-PCR 分析实验和 蛋白免疫印迹实验。 - HE CCl 血清肝功能指标的检测结果与苏木精 伊红 （ ）染色结果证实 4 急性 肝损伤小鼠模型构建成功，且存在性别差异，雄性小鼠受到的肝损伤比雌性小鼠 qRT-PCR Westernblotting CDK5RAP3 更严重。 和 实验结果表明，小鼠肝脏中 的 表达因CCl4 急性肝损伤的发生而遭到抑制，且在CCl4 急性肝损伤模型组不同性 别小鼠中的表达存在差异，雄性小鼠的CDK5RAP3 的表达水平显著低于雌性小 鼠。进一步的分子实验结果表明，与对照组相比，内质网应激相关基因Grp78 (glucose regulated protein 78kD) ATF4 (activating transcription factor 4 ) ATF6 、 、 (activating transcription factor 6 )、Erdj4 (dnaJ heat shock protein family (Hsp40) member B9) IL - 1β (interleukin 1beta) TNF-α (tumor