转基因动物与生物反应器 (2).pptVIP

该领域的一些其他代表性的例子如下： (一)建立异种抗原缺失或其表达水平低下的转基因猪 由异种抗原介导的超敏反应是异种移植临床应用的主要障碍，如异种抗原α1，3-半乳糖。 方法： 1、可以通过基因敲除技术靶向性地使与α1，3-半乳糖的合成密切相关的基因(如，α1，3-半乳糖基转移酶基因)失活．从而使α1，3-半乳糖缺失； 2、转入一些相关酶基因下调α1，3-半乳糖的合成。这种可降低超敏反映的效果已在动物模型中得以证实。 第九十五页，共一百六十一页，2022年，8月28日 (二)建立HLA转基因猪 采用转基因技术将人体相容性抗原如HLA-D、HLA-G等的基因转移至猪体内并获表达，建立HLA转基因猪，这样的转基因猪用于人体器官移植的供体，将会具有较低的免疫排斥反应： 第九十六页，共一百六十一页，2022年，8月28日 (三)建立人补体调节蛋白CD55、CD59的转基因猪 通过将人体CD55、CD59基因转入猪的基因组中，其仔猪的血管内皮细胞会表达CD55、CD59。当携带这种基因的猪器官(如心脏)移植到人体内后，将不会激活人体的补体系统，因此就可以克服超急性排斥反应。 第九十七页，共一百六十一页，2022年，8月28日 目前，通过采用转基因技术已使一些超敏反应得以克服。由于异种移植的免疫排斥反应涉及很多方面，比较复杂。不能仅考虑一方面的因素。因此建立联合型转基因猪的效果会更好，即同时转入多个相关基因到一只猪体内，或者通过不同转基因猪之间的自然交配，使其形成抗异种免疫排斥的特性组合。今后面临的主要问题是如何克服抗异种免疫排斥的能力，增强被移植器官的存活能力。 第九十八页，共一百六十一页，2022年，8月28日 9．2．3．5 转基因动物研究的最新进展 日前转基因动物的研究日新月异，主要体现在新型外源基因的转入和新型制作方法两个方面。一些代表性的进展如下： 第九十九页，共一百六十一页，2022年，8月28日 (一)转线粒体（基因）动物 线粒体是普遍存在于动植物细胞内的一种细胞器。转线粒体的尝试最早可迟溯到1989年，埃伯特(Ebert)将异源线粒体转入小鼠胚胎，经过注射的胚胎移植后发育正常。但在出生的仔鼠种检测不到异源线粒体。 转线粒体基因与转核基因存在许多明显的不同之处，这主要是因为核基因与线粒体基因的表达特征不同。目前这方面的研究报道还不多见。 第一百页，共一百六十一页，2022年，8月28日 (二)逆转录病毒载体注射MII期的卵母细胞 这种方法是对逆转录病毒载体感染发育早期的动物胚胎方法的改进。逆转录病毒栽体介导的基因整合的关键在于有丝分裂时出现核膜分解。 由于处于减数分裂中期(MⅡ)的卵母细胞无核膜的时间远远长于处于有丝分裂M期的细胞，因此为反转录病毒载体介导的基因插入提供了更大的可能性。 第一百零一页，共一百六十一页，2022年，8月28日 （三）精子与外源基因合并注射卵母细胞 以前采用将精子与外源基因共孵育一段时间，然后通过人工受精的方法制备转基因动物，最近， Anthony报道了一种新方法：首先将精子与外源基因共孵育1min，然后将精子的头部显微注射进MⅡ期的小鼠卵母细胞。结果证实可以提高转基因效率，而且操作程序得以简化。 第一百零二页，共一百六十一页，2022年，8月28日 9．3 转基因生物反应器 生物医药产业的发展经历了3个不同的历史阶段。 最早期是天然药物,如中草药(或加工成中成药),这是第一步。 但人类并不满足于此,以后通过化学方法合成新的药物。合成的药物成份单纯,有些是天然没有的,有些是对天然药物的改进,使它更为有效。 第一百零三页，共一百六十一页，2022年，8月28日 到了70年代后期,随着DNA重组技术的问世,诞生了基因工程药物或简称基因药物。高产值、高效率的基因药物的出现给药物生产带来了一场革命,推动了整个医药业的发展。 1982年美国Lilly公司首先将重组胰岛素投放市场。标志着世界第一个基因工程药物的诞生。 第一百零四页，共一百六十一页，2022年，8月28日 基因工程药物 1、定义：通过转基因技术利用某一种生物体生产这种外源基因表达的活性物质 2、生产基因工程药物的基本方法是： 1）、将目的基因用DNA重组的方法连接在载体上 2）、将载体导入靶细胞(微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞) 3）、使目的基因在靶细胞中得到表达 4）、将表达的目的蛋白质提纯、加工成制剂，从而成为蛋白类药或疫苗。 第一百零五页，共一百六十一页，2022年，8月28日 现有或正在开发中的基因工程约物大致有以下几类：单克隆抗体、疫苗、基因治疗药物、干扰素、白介素、生长因子、重组可溶性受体、反义药物、人生长激素、