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淋巴细胞转化试验
【教学对象与学时】
教学对象:七年制本科
学时:8 学时
【预习要求】
了解淋巴细胞转化试验的原理
了解小鼠处死,取脾和胸腺的方法
了解细胞培养的无菌操作方法
了解淋巴细胞转化试验的检测方法
【目的要求】
掌握动物实验及细胞实验操作方法,提高学生的动手能力和综合分析的能
力。
【重点和难点】
重点:淋巴细胞转化实验的原理、小鼠处死,取脾和胸腺的方法、细胞培养
的无菌操作方法、细胞计数的方法、淋巴细胞转化试验的检测方法。
难点:小鼠处死,取脾和胸腺的方法、细胞培养的无菌操作方法、细胞计数
的方法、MTT 法检测淋巴细胞的转化增殖情况。
【教学过程设计】
实验过程需要有一段48 小时淋巴细胞孵育转化的时间,安排课程时要间隔
开时间,以保证下次课有好的结果。
【课前讲解】
淋巴细胞转化实验的原理
淋巴细胞转化实验的检测方法
淋巴细胞转化实验的临床应用
【实验讲解】
实验目的:掌握淋巴细胞转化实验的原理和操作方法
实验动物:ICR 小鼠 18-20g
实验主要试剂:PBMI1640 培养液,小牛血清,白细胞计数液,ConA ,MTT ,
DMSO 。
主要观察指标:淋巴细胞的增殖活性
实验设计方法:单细胞悬液的制备、细胞计数、细胞加板、细胞培养、MTT
掺入、结果测定。
【分析讨论】
淋巴细胞转化实验的原理是什么?
淋巴细胞转化实验有几种检测方法?
淋巴细胞转化实验中有哪些需要注意的问题?
【实验报告要点】
淋巴细胞转化实验的原理和操作方法。
结果分析。
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