高中生物选修三知识点总结.docxVIP

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高中生物选修三知识点总结 基因工程是高中生物核心知识点。基因工程是指按照人们的愿望,进行严 格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。下面给大家分享一些关于高中 生物选修三知识点,希望对大家有所帮助。 高中生物选修三知识点 1 基因工程(DNA 重组技术):体外、定向、分子水平 基本工具:限制性核酸内切酶(限制酶)来自原核细胞,识别双链 DNA 分子 的某种特定的核苷酸序列,使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二 酯键断开。 DNA 连接酶: E ·coliDNA 连接酶(只黏性末端) T4DNA 连接酶(黏、平末端也可但效率低) 载体:质粒、入菌体的衍生物、动植物病毒 条件:①能在宿主细胞内稳定存在复制表达 ②一种或多种限制酶切点 ③标记基因(抗生素抗性基因、荧光基因) 基本操作程序: 1、 目的基因的获取: (人工合成、体内提取) ①从基因文库获取 ②PCR 技术扩增目的基因:模板、Taq 酶(热稳定 DNA 聚合酶)、原料能量 (dXTP)、引物(过量) 五物混合,加热至 90~95℃ ,DNA 解旋,冷却到 55~60℃ ,引物与互补 DNA 链结合,加热至 70~75℃, Taq 酶从引物起始互补链的合成 ③人工化学合成:基因比较小,核苷酸序列已知 2、基因表达载体的构建: (基因工程的核心) 启动子:DNA 片段,基因的首端,RNA 聚合酶识别和结合的部位 目的基因 终止子:DNA 片段 ,基因的尾端 标记基因:鉴别受体细胞中是否含有外源基因,从而将含有外源基因的细 胞筛选出来。 (复制原点:仅自我复制的需要,整合到宿主染色体上再表达的不需要) 3、将目的基因导入受体细胞: 转化:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的 过程。 (1)导入植物细胞(体细胞、受精卵) ①农杆菌转化法(双子叶植物、裸子植物) 受损,伤口细胞分泌酚类化合物,吸引农杆菌移向,Ti质粒上 T-DNA(上插 目的基因)转移至受体细胞整合到受体细胞染色体上 ②基因枪法(单子叶植物) ③花粉管通道法 (2)导入动物细胞(受精卵)显微注射技术 (3)导入微生物细胞 优点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少、对人体无害(大肠杆菌) 步骤:Ca2+ 处理细胞,使其成为感受态细胞,重组表达载体 DNA 分子溶于 缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA 分子 4、 目的基因的检测与鉴定: ①DNA 分子杂交技术:转基因生物的染色体 DNA 上是否插入了目的基因(目 的基因是否进入原核细胞) 转基因生物的染色体 DNA(原核质粒)+有同位素标记的目的基因 ②RNA 分子杂交技术: 目的基因是否转录出了mRNA 转基因生物的 mRNA+有 同位素标记的目的基因 ③抗原-抗体杂交: 目的基因是否翻译成蛋白质 转基因生物的蛋白质+相应 的抗体 胰蛋白酶处理 ④个体生物学水平的鉴定:抗虫抗病的接种实验 高中生物选修三知识点 2 蛋白质工程(自然界不存在的蛋白质) 预期蛋白质功能,设计蛋白质结构,推测氨基酸序列,找对应的脱氧核苷 酸序列,人工合成基因,基因工程,蛋白质产品 高中生物选修三知识点 3 细胞工程: (一)植物细胞工程: 1、植物组织培养技术: (1)原理:植物体细胞的全能性 (2)过程:离体的植物器官、组织或细胞,脱分化(避光),愈伤组织(未分 化,薄壁细胞),再分化,根芽,细胞分裂分化,植株 (3)条件:无菌(防止微生物污染) 营养(无机盐、有机物、水) 激素(生长素、细胞分裂素,=1 诱导脱分化,1 生根,1 生芽,激素杠杆) 离体 2、植物体细胞杂交技术:克服生殖隔离(不同生物远缘杂交不亲和的障碍) (二)动物细胞工程: 1、动物细胞培养: (1)原理:一些动物细胞在体外可生长增殖 (2)过程: 动物组织块,剪碎,胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,分散成单个细胞,制成 细胞悬液 原代培养:转入培养瓶,细胞贴壁(培养瓶内壁光滑无毒易于贴附),细胞 有丝分裂,接触抑制 分瓶继续传代培养(10 代以内以保持正常的二倍体核型,50 代以上癌细胞) (3)条件: 无菌无毒的环境:用具无菌处理;培养液中加抗生素;定期更换培养液(清除 代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害) 营养:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清血浆 温度和 pH:动物体温(哺乳 36+ -0.5℃),pH=7.2-7.4 气体环境:95%空气+5%CO2(维持培养液 pH) 2、动物体细胞核移植技术(克隆动物)胚胎细胞核移植(易) 移入去核卵母 细胞 3、动物细胞融合(细胞杂交):除物理化学法外,还可用灭活的病毒诱导 4、杂交瘤技术(生产单克隆

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