分子生物学常用技术 核酸的分离与纯化 分子生物学.pptx

核酸的分离与纯化主讲人:XXX 核酸提取亦是临床分子诊断最关键的操作，直接关系到实验室的成败与否，是临床分子诊断最容易发生问题步骤。背景核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸提取也成为了分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作。 核酸的存在形式核酸核酸是脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的总称。是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。RNADNA细胞核DNP线粒体 环状DNA。细胞质中，mRNA，rRNA，tRNA。 提取核酸总的原则 保证核酸一级结构的完整性； 排除其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度； 核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子； 其他核酸分子，也应尽量去除。 温度不要过高；保持核酸的完整性 遗传信息全部储存在一级结构之中，核酸的一级结构还决定其高级结构的形式以及和其他生物大分子结合的方式。控制pH值范围（pH值4-10）；保持一定离子强度；减少物理因素对核酸的机械剪切力；防止核酸酶对核酸的降解。 核酸提取步骤细胞裂解酶处理核酸与其他生物大分子物质分离核酸纯化 核酸提取步骤使细胞裂解，核酸释放物理作用化学作用生物作用细胞裂解酶处理核酸与其他生物大分子物质分离核酸纯化 核酸提取步骤细胞裂解酶处理核酸与其他生物大分子物质分离核酸纯