分子生物学技术的发展与应用 数字PCR技术 分子生物学.pptx

数字PCR技术主讲人:XXX 数字PCR技术（Digital PCR）01Digital PCR-技术原理02Digital PCR -发展历史03Digital PCR-应用前景 Digital PCR-技术原理01 Digital PCR-技术原理什么是Digital PCR？本质上是把弱信号从噪音信号中“拎”出来 PCR扩增和荧光信号分析。Digital PCR-技术原理PCR扩增阶段:　1.稀释样品到单分子水平。 　2.平均分配进行反应。有记为1（必包含拷贝）无记为0荧光信号扩增结束数字PCR与qPCR实时荧光测定方法不同： Digital PCR-技术原理 qPCR每个循环进行实时荧光测定。样品的PCR 扩增效率可能 与校准物的扩增效率不同。低拷贝数的目标DNA 分子 不能通过扩增检测到。qPCR 主要依赖校准物制备标准曲线 进而确定未知样品的浓度，是相对定 量的方法。dPCR扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集。直接计数目标分子数 不依靠任何校准物或外标。单DNA 模板出现在反应室 未被检出可能性非常低。通过计数单个分子从而实现绝对定量。Digital PCR优点 Digital PCR-应用前景02 Digital PCR应用产前诊断　　1997年卢煜明教授课题组发现孕妇