分子生物学在水产领域的应用.docx

分子生物学在水产领域的应用 摘要：在当代社会，现代生物技术的发展日新月异，其中以研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的分子生物学技术，正迅速成为现代生物技术中最具有活力的分支。本文主要研究分子生物学在水产领域的一些应用。 关键词：核酸杂交，PCR技术，育种，疾病诊断与预防。 分子生物学技术的迅猛发展,是近年来生命科学中最为突出的特征之一。目前,分子生物学理论与技术已广泛的应用于动植物品种的改良、鉴定以及人类疾病诊断与治疗等领域。近些年,分子生物学技术逐步涉入水产领域,并体现出极高的应用价值和经济价值。现就分子生物学相关技术如核酸杂家技术、PCR、mtRNA等技术在水产动物中的应用作简要介绍。 核酸杂交技术 自从人们认识到 “杂交优势”现象后，作为品种改良的重要手段，杂交育种长期以来一直被普遍采用。在推动农业进步中发挥了非常重要的作用。核酸杂交技术主要是通过对染色体进行操作。目前已经成功应用于水产品的育种方面。一种是多倍体培育技术，切实可行的是育种中采用的三倍体技术。该技术先是诱导出四倍体后再与原来的二倍体交配，获得倍间三倍体。这种方法可以获得100%的三倍化率，并且育苗操作技术与常规无异。三倍体个体生长优势明显。在鱼、虾、贝的养殖生产中均已获得成功。如刘筠教授领导的研究小组培育的鲤鲫异源四倍体与普通鲫鱼、鲤鱼交配得到的三倍体鲤鱼、鲫鱼已推广至全国20个省（市）。在日本，17个地方自治体的鱼三倍体化、全雌化等技术已经获得成功，神奈川县已经进行全雌三倍体鲇鱼培育。广岛县养殖的3 倍体牡蛎已经上市。另外，采用杂交等人工诱导进行的雌核发育，不但可以建立鱼类纯系，还可以控制水生生物的性别，实现全雌化。在提高水生生物的生长同时，为解决转基因鱼遗传和生态安全问题提供了解决的办法。 PCR 技术的应用 PCR技术即聚合酶链反应，是今年来分子生物学领域中迅速发展和广泛应用的一种技术。它能快速、特异地在体外扩增所希望的目的基因或 DNA片段 （一种体外扩增核酸序列）从而得到多个核酸拷贝的技术。该技术生产的诊断试剂盒，可以在了解病原生物特殊的遗传结构的基础上，设计出专一性引物再通过 .PCR扩增产生出产物，可以快速诊断病原的存在。 1992年以来，WSSV病已在 4种以上的对虾中发现，并遍布亚洲各养虾国。该病的主要症状是在头胸甲上有白斑，病原是一种无包涵体、杆形、具有囊膜的病毒，称为白斑症病毒。它的致病性很强，普遍引起养殖对虾的大量死亡。自WSSV病（白斑症病毒）发生 6年来， 该病一直是对虾养殖业的棘手问题。战文斌，铃木信一等人建立了利用，PCR技术快速测定该病毒技术，可以实现对不同生活阶段的对虾以及对虾生活环境中的有关生物进行快速检测，对了解病毒的感染与传播，进而对控制该病毒的继续蔓延有重大意义。目前，市面上已经有商业化的 PCR诊断试剂来诊断对虾白点病毒。此外，PCR技术还用于对虾暴发性流行病，对虾杆状DNA病毒的克隆和序列分析，为治疗对虾病毒病提供了依据。此外，日本高知县从 1999年4月开始在水产厅养殖研究所、高知大学的指导下，利用 PCR法进行鲍鱼的育种，已达到实用化阶段。 线粒体 DNA(mtDNA)研究技术 动物 mtDNA为共价闭合的环状超螺旋分子，包括一条重链和一条轻链，绝大多数的蛋白质编码基因均在重链上。由于基因组的结构相对简单、稳定, 故便于进行结果分析。遗传方式为严格的母系遗传,且没有遗传重组, 一个个体就代表一个母系集团, 便于进行群体分析。mtDNA进化速度较快是单拷贝核DNA的 5~10倍，在群体内变异大，近缘种间解析的灵敏度较高。每个细胞中mtDNA有1000~10000个拷贝，因其分子量小，又具有线粒体双层膜的保护，提取方法简单，结果重复性高。 mtDNA 研究技术在鱼类系统研究上有很好的应用。根据遗传距离可以得到较直观的分子关系图, 从而更准确地确定鱼类种内种间的系统发生关系,并更好地探求鱼类群体遗传结构。例如，Meyer和Wilson对南美肺鱼、辐鳍鱼和矛尾鱼的 mtDNA基因组进行分析测序，推测四足动物起源于肺鱼类这一比较形态学的重要成果。1997年肖武汉等用PCR技术对福尔马林浸泡的云南鲴部分细胞色素b基因序列进行了扩增和测序。因此用PCR介导的鱼类mtDNA研究方法, 可利用标本馆保存的标本和微量组织来提取并扩增mtDNA进行研究,是保护濒危物种的一种非常好的方法。 育种 实践证明,选育是获得鱼类和其他水产品优良遗传性状的一条重要途径。选育首先要制定一个育种计划,根据计划,个体和家系的选择要以其商业价值为出发点,而且选育必须在具有足够变异、能获得有益的遗传性状的基础上进行。如果在一个鱼群中只有低水平的遗传变异,那么可能很有必要在实施选育计划前重新引进新种以提高