TCI 011-2021 细菌生物被膜的培养、观测和耐药性评测技术指南.docxVIP

中国国际科技促进会 发布 ICS 07 .100.01 CCS C50 团 体 标 准 T/CI 011—2021 细菌生物被膜的培养、观测和耐药性评测 技术指南 Technical Guidelines on Biofilm Cultivation, Examination and Resistance Evaluation 2021-8-5 发布 2021-8-5 实施 目 录 1. 适用范围 1 2. 术语和定义 1 2.1 生物被膜： 1 2.2 交叉感染： 1 2.3 Colony Forming Unit (CFU): 1 2.4 群体感应： 1 2.5 SEM 1 3. 细菌生物被膜培养与观测方法归类表 2 4. 细菌生物被膜培养方法与技术标准 4 4.1 体外静态生物被膜培养 4 4.1.1 孔板培养法 5 4.1.2 玻璃珠培养法 6 4.1.3 玻片培养法 8 4.1.4 Peg-lid 培养法 9 4.2 体外动态生物被膜培养 11 4.2.1 管式培养法(tubing-biofilm) 11 4.2.2 池式培养法(flow-cell biofilm) 14 5. 细菌生物被膜定量与观测技术与标准 16 5.1 结晶紫染色法 16 5.1.1 实验材料 16 5.1.2 操作流程 17 I T/CI 011—2021 5.1.3 观察与定量结果展示 17 5.1.4 技术要点 17 5.2 死活菌细胞染色法 18 5.2.1 实验材料 18 5.2.2 操作流程 18 5.2.3 观察与定量结果展示 19 5.2.4 技术要点 19 5.3 CFU 计数法 19 5.3.1 实验材料 20 5.3.2 操作流程 20 5.3.3 观察与定量结果展示 21 5.3.4 技术要点 21 5.4 干重/湿重定量法 21 5.4.1 实验材料 22 5.4.2 操作流程 22 5.4.3 观察与定量结果展示 23 5.4.4 技术要点 23 5.5 3D 荧光成像定性定量法 23 5.5.1 实验材料 23 5.5.2 操作流程 24 5.5.3 观察与定量结果展示 24 5.5.4 技术要点 24 5.6 激光共聚焦荧光显微镜观测法 24 5.6.1 实验材料 24 5.6.2 操作流程 24 5.6.3 观察与定量结果展示 25 5.6.4 技术要点 25 5.7 电子显微镜观测法 25 5.7.1 实验材料 25 5.7.2 操作流程 25 5.7.3 观察与定量结果展示 26 5.7.4 技术要点 26 6. 生物被膜耐药性检测方法与评定标准 26 6.1 最小抑菌浓度法 26 6.1.1 实验材料 27 6.1.2 操作流程 27 6.1.3 技术要点 27 6.2 流动式抑菌法 28 6.2.1 实验材料 28 6.2.2 操作流程 28 6.2.3 技术要点 29 附录 Xa 孔板生物被膜培养法培养步骤 i 附录 Xb玻璃珠生物被膜培养法培养步骤 ii 附录 Xc玻片生物被膜培养法培养步骤 iii III T/CI 011—2021 附录 XdPeg-lid 生物被膜培养法培养步骤 iv 附录 Xe生物被膜管式培养法(Tubing biofilm) 培养步骤 v 附录 Xf生物被膜池式培养法(flow-cell biofilm) 培养步骤 vi 附录 Xg结晶紫染色法分析孔板培养生物被膜的操作流程 vii 附录 Xh结晶紫染色法分析玻璃珠培养生物被膜的操作流程 viii 附录 Xi结晶紫染色法分析玻片培养生物被膜的操作流程 ix 附录 Xj结晶紫染色法分析 peg lid 培养生物被膜的操作流程 x 附录 Xk孔板培养的生物被膜死活菌细胞染色步骤 xi 附录 Xl玻片培养的生物被膜死活菌细胞染色步骤 xii 附录 Xm池式培养的生物被膜死活菌细胞染色步骤 xiii 附录 Xn孔板培养的生物被膜 CFU 测定的操作流程 xiv 附录 Xo 玻璃珠培养的生物被膜 CFU 测定的操作流程 xv 附录 Xp 玻片培养的生物被膜 CFU 测定的操作流程 xvi 附录 Xq peg lid 培养的生物被膜 CFU 测定的操作流程 xvii 附录 Xr 管式培养