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胚胎移植注意事项 胚胎移植是一项操作严谨，要求高的技术。胚胎移植每个操作环节都十分重要，都直接影响胚胎移植成败。因此作为手术人员，我们应该有很强的责任意识，正规的操作理念，严格的无菌操作观念。 为了使胚胎移植技术严谨、规范，提高胚胎移植成功率，现将胚胎移植中的注意事项归纳如下： 一、同期发情及超排处理1、供体超排处理供体放栓（撤栓）时间：19:00；超排处理的时间为早7:00，晚19:00；第一次试情时间为撤栓后第二天早5:00，配种时，每间隔6h配1次。 2、受体同期发情处理“PG”法，注射时间为处理当天下午16:00；“海绵栓+PG”法，撤栓和PG处理时间为处理当天下午16:00；受体试情时间为PG处理后的第二天早8:00，下午16:00，晚20:00；试情时，记录具体的发情时间，认真做好发情记录，按照《受体羊发情记录表》的要求填写。 二、超排的具体要求1、严格遵守超排时间，按照超排方案的剂量要求注射，做到剂量准确，注射完全；2、超排所用的注射器，用于PMSG的注射器要求1批换1次，用于FSH的注射器，每天要求换1次；3、超排所用的注射器、CIDR栓、药瓶统一收回，统一处理，严禁乱扔，乱放；4、超排时人员安排，要求每批由专人负责，即注射PMSG1人，注射FSH1人；5、符《胚胎移植所用药品跟踪单》；6、符《胚胎移植人员安排表》；7、符《受体羊发情记录表》。 三、手术前的准备工作1、羊只手术部位的消毒用肥皂温水将手术部位剃干净，擦十；清水冲洗干净；0.1%新洁尔灭消毒手术部位，擦十；5%的碘酊消毒和75%酒精脱碘。 2、手术器械的准备手术器械在使用之前在0.1%新洁尔灭溶液中浸泡30min，并打开器械开关；使用时浸泡在生理盐水中（注意及时更换）；与PBS液接触的注射器及冲卵管在使用之前，用PBS液清洗1次。 3、手术人员手臂的消毒手臂要严格消毒，先剪短磨光指甲，用肥皂水清洗手臂；在0.1%新洁尔灭消毒盆中浸泡5min；在生理盐水盆中清洗干净；注意消毒液和生理盐水的及时更换。 4、手术后手术器械及器械盘的清洗与灭菌手术后，手术器械需认真、彻底的清洗，以便下次使用；用清水及洗涤液将手术器械和器械盘上的污垢或斑点清洗干净；用流水冲洗5次；用蒸馏水冲洗5次；放入恒温干燥箱，将干燥箱的温度调至160°C，处理1.5h。 四、手术时操作要求1、手术时，必须戴医用手套；2、手术要求仔细、规范、准确、迅速、手法轻柔、配合默契，及时喷洒生理盐水，尽可能的缩短冲胚时间、移植时间；3、手术缝合要仔细、认真、保证缝合质量，促进伤口愈合。 五、黄体鉴别1、供体采卵时黄体的鉴别正常黄体 黄体情况（直径） 黄体级别 标记方法 5-6mm 1 nA 3-4mm 2 nB 2mm 3 nc 2mm 4 nD 注：“n”表示黄体个数，A、B、C、D分别表示黄体级别异常黄体A、中间有“红心”周围包裹发白的组织，用nm表示（“n”表示个数）;B、类似于黄体退化后形成的白体，凸起，用nn表示（“n”表示个数）。 2、受体羊卵巢情况及处理办法 卵巢情况 黄体级别 处理方法 表示方法 两侧大黄体或同侧两个大黄体， 没有卵泡 1 选择较大黄体侧移植 1A 一侧大黄体，没有卵泡 2 移植黄体侧 1B 一侧大黄体，一侧小卵泡 3 刺破卵泡移植在黄体侧 1c 同侧大黄体和小卵泡 4 刺破卵泡移植在黄体侧 1D 同侧或对侧有大黄体和大卵泡 5 不移植 1E 小黄体 6 不移植 1F 注：①大黄体是指颜色鲜红，突出卵巢表面部分直径4mm以上的黄体; 小黄体是指直径小于4mm的小黄体; 小卵泡指直径在2mm以下的卵泡； 大卵泡指直径在2mm以上的卵泡； “1”表示黄体，A、B、C、D、E、F分别表示黄体级别。 六、检胚室的操作要求1、Holding液及冷冻液的灭菌：使用前用0.22um的滤器，过滤时应弃取开始2—3滴，然后使用。 2、移植针的消毒程序：第一次使用之前用Holding液清洗，移植针使用过程消毒时，其消毒程序：先用75%酒精棉擦洗，在用0.9%生理盐水棉擦洗，最后在用Holding液清洗。 3、检胚针的清洗：第一次使用之前用Holding液清洗清洗，每检一只羊的胚胎时，用Holding液清洗一次。 4、解冻胚胎时，胚胎细管的消毒，用灭菌布擦干。 5、冷冻胚胎标记： 胚胎细管：按照品种、耳号、胚胎类型、胚胎个数标记，具体表示方法如下： 道塞特（Dorset）:红色标记，用“D”表示；萨福克（Suffolk）:黑色标记，用“S”表示；杜泊（Dorper）:蓝色标记，用“P”表示；德美（Merino）:绿色标记，用“M”表示。 拇指管：按照胚胎类型、冷冻日期装管，编号，具体表示方法：1号管用“1”表示，2号管用“2”表示，依次类推，胚胎类型的表示方法：在拇指管上分别标注“M”