PTPRQ通过与IQGAP1相互作用促进结直肠癌细胞增殖和迁移的作用及机制初步研究.pdf

摘要 摘要 目的： 初步探究 PTPRQ 促进结直肠癌细胞增殖和迁移的分子机制，为结直肠癌的 诊断和防治提供靶点和治疗策略。 方法： 采用免疫组织化学分析 PTPRQ 在结肠腺癌中的表达，分析其表达与临床病 理特点和预后的关系。采用免疫沉淀和质谱，分析与 PTPRQ 相互作用的蛋白。 免疫共沉淀验证 PTPRQ 和 IQGAP1 蛋白间的相互作用，免疫组织化学分析两者 在结肠腺癌中表达的相关性。采用 siRNA 干扰 IQGAP1 的表达，CCK8 和划痕 实验观察 IQGAP1 沉默是否会逆转 PTPRQ 的效应。采用通用型抗酪氨酸磷酸化 抗体检测 PTPRQ 对 IQGAP1 酪氨酸磷酸化水平的影响。 结果： 共收集结肠腺癌组织样本 94 例和癌旁组织样本 86 例。与癌旁组织相比， PTPRQ 在结肠腺癌组织中的表达显著增高（P ＜0.0001）。PTPRQ 的表达与年龄、 性别、结直肠癌的 TNM 分期等无关，没有统计学差异。与 PTPRQ 低表达者相 比较，PTPRQ 高表达的患者预后更差 （P=0.039 ）。免疫共沉淀和质谱结果显示， PTPRQ 与 IQGAP1 存在蛋白间相互作用。免疫组织化学结果显示，PTPRQ 和 IQGAP1 在结肠腺癌组织中的表达呈正相关（R=0.6114 ，P0.001 ）。与对照 siRNA 相比，沉默 IQGAP1 的表达后，显著下调了 PTPRQ 过表达细胞的增殖速度和迁 移能力，进一步的磷酸化检测发现，与对照组相比，PTPRQ 过表达的 HCT116 细 胞中，IQGAP1 的酪氨酸磷酸化水平显著下降。 结论： PTPRQ 在结肠腺癌中高表达，且与预后不良相关；PTPRQ 通过与 IQGAP1 相互作用促进结直肠癌细胞增殖和迁移；PTPRQ 导致 IQGAP1 酪氨酸去磷酸化。 关键词：PTPRQ ；IQGAP1 ；结直肠癌；去磷酸化；增殖；迁移 II 目录 目录 摘要 ···············································································II ABSTRACT ·····································································III 目录···············································································V 中英文缩略词表 ·······························································VI 第 1 章 引言······································································1 1.1 PTPs 家族参与结直肠癌发生发展 ···············································1 1.2 PTPRQ ——结直肠癌的潜在癌基因 ············································2 1.3 IQGAP1：促进癌发生和转移的关键分子 ······································3 1.4 课题设想 ···············································································4 第 2 章 材料与方法·····························································6 2.1 材料 ····················································································6 2.1.1 细胞株和组织芯片··