人工种子与植物脱毒详解.pptxVIP

人工种子与植物脱毒详解;人工种子（Artificial seeds）;人工种子的种类 根据包被的程度可将人工种子分为三大类：;;以器官为繁殖体的人工种子;以体细胞胚为繁殖体的人工种子;人工种子研制的意义;繁殖体的培养技术;人工种子对体细胞胚繁殖体的要求;其次，作为实用化的体细胞胚种子还必须满足一定的数量需求，规模化生产是其基本前提。 Choi等（2002）建立了人参体细胞胚大规模液体培养体系，每500ml容器可生产体细胞胚12,000个。在体细胞发育至子叶期早期，将期转入1/2MS无机盐加9％蔗糖的培养基中诱导，获得了良好效果。;微型营养器官繁殖体的培养;芽繁殖体的培养;部分植物繁殖体诱导培养条件;繁殖体的包埋;人工种皮;外种皮常用材料： Elvax 4260(乙烯、乙烯基乙酸和丙烯酸共聚物，1987，美国)涂膜，价高，操作复杂，效果不佳。 Tullanox和Cab-0-sil(二氧化硅化合物），以粉末状包裹在人工种子胶囊外层，操作时只需将胶囊在材料中滚动即可。 硅酮种衣，能抗真菌，渗入水蒸汽和氧气，处于试验之中。;人工胚乳;包埋技术;包埋技术;植物人工种子的成苗率;贮藏;人工种子可能最先用于无性繁殖植物 微芽，试管块茎、鳞茎等作繁殖体时，成苗率高且出苗整齐，具有田间应用的可行性，同时，离体培养的繁殖体可完全去除病原物。 传统上的试苗由于体积大、对携带储运条件要求苛刻因而限制了使用规模。如果利用人工种子将可能首先实现无性繁殖植物种子生产的彻底革命。 1. 以微芽为繁殖体的人工种子技术，有可能首先在无性繁殖的果树、花卉、林木等植物中得以应用。;人工种子的发展和应用前景;第24页/共68页;以体细胞胚为繁殖体应用的局限性及可能性 以花或果实为经济产品的多年生植物如果树有可能出现较长的幼年期，使开花结果推迟，且还可能出现果实不整齐的现象。 以营养器官或木材为产品的植物中，对性状一致性要求不严格的植物中，体细胞胚繁殖体具有其它繁殖体不可替代的优越性。;人工种子的发展和应用前景;存在问题;小结;思考题;植物离体培养脱毒技术;病毒的特性及其对植物的危害;;;病毒在植物体内的分布;病毒在植物体内的分布具有不均匀性的理??假说 (1) 能量竞争 病毒核酸和植物细胞分裂时DNA合成均需要消耗大量的能量，而分生组织细胞本身很活跃，其DNA合成是自我提供能量自我复制，而病毒核酸的合成要靠植物提供能量来自我复制，因而就得不到足够的能量，从而就抑制了病毒核酸的复制。 (2) 传导抑制 病毒在植物体内的传播主要是通过维管束实现的，但在分生组织中，维管组织还不健全，从而抑制了病毒向分生组织的传导。;(3) 激素抑制 在分生组织中，生长素和细胞分裂素水平均很高，因而阻滞了病毒的侵入或者抑制病毒的合成。 (4) 酶缺乏 1969年，Stace-Smith提出，可能病毒的合成需要的酶系统在分生组织中缺乏或还没建立，因而病毒无法在分生组织中复制。 (5) 抑制因子 1976年，Martin-Tanguy等提出了抑制因子假说，认为在分生组织中存在有某种抑制因子。;;热处理脱毒法;第39页/共68页;热处理脱毒法;热空气处理脱毒法 将试验母株在高温生长室中生长一个阶段，使其顶端分生组织和次生分生组织迅速生长，然后切取其茎尖分生组织进行离体培养。 生长室温度（35℃ ~40℃） 光照强度（3000~10000Lx);愈伤组织继代兼热处理钝化TMV和CMV获得烟草无病毒植株的效果;;马铃薯在37℃下处理10～20天能除去卷叶病毒。;热处理脱毒法;茎尖培养脱毒法;康乃馨不同大小茎尖与康乃馨斑驳病毒的脱毒效果;影响茎尖培养法脱除植物病毒的因素;微体嫁接法(micrografting);苹果茎陷病毒的茎尖培养脱毒 接穗： 0.2mm茎尖 砧木：无菌实生苗的胚轴（带两片子叶） 方法：劈接法将接穗插入两片子叶之间的组织中;微体嫁接法(micrografting);珠心组织培养脱毒法;;第54页/共68页;愈伤组织培养脱毒法;第56页/共68页;几种马铃薯病毒病的症状;血清鉴定法(serologic test);血清鉴定法;生物鉴定法（指示植物鉴定）;生物鉴定法;②嫁接法 一些木本多年生果树或草莓等无性繁殖草本植物，其病毒不是通过汁液而是其他介体传播[如草莓黄化病毒是由蚜虫（Mtzus fragaefolii）传播的，这种病毒鉴定可采用嫁接法，即用鉴定植株芽作接穗，指示植物作砧木。根据指示植物的表现判断是否脱除了病毒。;电镜检查法;分子检测法;无病毒原种的保存与繁殖;;思考题 1．利用茎尖分生组织培养脱除去植物病毒的原理。 2．哪些因素会影响茎尖培养的脱毒效果？ 3. 如何检测脱毒效果？ 4. 基本概念;谢谢观看！