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第1页/共101页免疫学检测技术第2页/共101页第3页/共101页抗原和抗体可以发生高度专一性的结合第4页/共101页 抗原和抗体可以发生高度专一性的结合第5页/共101页抗原和抗体可以发生高度专一性的结合第6页/共101页Equivalence – Lattice formation抗原和抗体可以发生高度专一性的结合抗原或抗体检测原理: 借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象,对标本中的抗原或抗体进行定性或定量的检测。第7页/共101页抗原或抗体检测原理第8页/共101页免疫学(Immunology): 是研究抗原性物质、免疫系统、免疫应答的规律及免疫应答的调节的一门科学。免疫的定义(Immunity):免疫是机体识别自我与非自我的过程。排除异己,维护自身稳定的生理反应。第9页/共101页免疫的功能: 1.抵抗感染(Defense):机体能抵抗病原微生物侵袭的能力。又称免疫防御。 抗菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生虫免疫2. 自身稳定(Homeostasis):机体在新陈代谢过程中,产生大量的衰老死亡细胞,免疫的第二个功能就是清除这些细胞,维持机体的生理平衡。3.免 疫监视(Immunological surveillance):机体细胞会因物理、化学和病毒等生物因素的影响,使细胞发生癌变,形成肿瘤等,机体可识别、清除这些细胞,这是免疫系统的第三个功能。当这一功能低下或失调时,会导致肿瘤或癌症。第10页/共101页抗原 (Antigen)抗原概念 凡能刺激机体产生特异性抗体和致敏淋巴细胞,并能与相应抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生反应的物质。抗原性(Antigenicity):包括免疫原性和反应原性二个方面免疫原性:抗原能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞的性能。 反应原性:抗原与特异性抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生反 应的性能。第11页/共101页抗原 (Antigen)构成抗原的条件1. 异物性:机体免疫细胞能识别自身和异己物质,只有外源性的物质才具有免疫原性,产生免疫反应。亲缘关系越远,差异越大,抗原性越强。自身抗原:自身组织发生异常变异、免疫功能紊乱、眼球晶体蛋白、精子蛋白、甲状腺蛋白大分子胶体:一般在10 kD以上 。 3. 具有复杂的立体结构或空间构象. 如明胶分子量虽然为100 kD,但结构简单,免疫原性差。第12页/共101页抗原如何被识别抗原的特异性 抗原决定簇:抗原分子表面具有免疫活性的化学基因,是抗原与抗体结合的部位。 抗原分子中抗原的特异性由抗原决定簇决定。第13页/共101页第14页/共101页一种细菌可以刺激多少种抗体产生?抗原第15页/共101页一种细菌可以刺激多少种抗体产生?根据抗原的化学性质分:天然抗原:微生物及其产物抗原如菌体抗原(O 抗原) 鞭毛抗原(H 抗原)表面抗原(如大肠杆菌的K 抗原)细菌的毒素抗原病毒抗原(V 抗原)人工抗原:人工合成多肽、蛋白等第16页/共101页抗体(Antibody)一、概念 是抗原刺激B淋巴细胞, 使之增殖分化成浆细胞而产生的能与抗原发生特异性反应的免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)第17页/共101页抗体(Antibody)一、概念二、免疫球蛋白的基本结构免疫球蛋白:在人和动物血液、组织液及其他分泌液中的一类结构相似的球蛋白。1.由4 条肽链组成:2 条重链, 2 条轻链2.一个抗体单分子:2 个抗原结合位点第18页/共101页抗体(Antibody)第19页/共101页抗体(Antibody,Ab)免疫球蛋白的双重性 免疫球蛋白是一种蛋白质,是抗体( Ab1 );同时又可引起机体产生抗体(抗抗体,Ab2 ),所以既是抗体又是抗原。 Ag Ab1 Ab2 第20页/共101页第21页/共101页抗体(Antibody,Ab)免疫球蛋白的双重性免疫球蛋白的功能 1. 与抗原结合 2. 激活补体 3. 组织结合 4. 调理作用 5. 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)第22页/共101页免疫球蛋白的功能第23页/共101页抗体(Antibody) 的产生与功能第24页/共101页抗体抗体产生的主要过程第25页/共101页第26页/共101页 抗体的制备注射抗原(如类毒素)抗体?抗原?血清第27页/共101页抗体的制备抗血清:指抗原人工免疫实验动物,获得含 特异性抗体的血清。多克隆抗体 (PAb): 多个抗原决定簇免疫机体 所产生的多种抗体的混合物。单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb) :只针对某一特定的抗原决定簇,纯度高的抗体。第28页/共101页多克隆抗体与单克隆抗体第29页/共101页多克隆抗体与单克隆抗体的制备第30页/共101页单克隆抗体的
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