第三章基因工程第一节基因工程工具酶wangjx.pptVIP

第一节 基因工程中的工具酶 限制性内切酶—主要用于DNA分子的特异切割 DNA甲基化酶—用于DNA分子的甲基化 核酸酶—用于DNA和RNA的非特异性切割 核酸聚合酶—用于DNA和RNA的合成 核酸连接酶—用于DNA和RNA的连接 核酸末端修饰酶—用于DNA和RNA的末端修饰 其它酶类--用于生物细胞的破壁，转化，核酸纯化，检测等 第一页，共四十二页。 一、限制性内切酶 （一）、限制修饰系统的种类 （二）、限制性内切酶的定义、命名 （三）、限制酶的特点 （四）、异源同序酶（isoschizomer，同裂酶） （五）、 限制酶的用途 第二页，共四十二页。 （一）、限制修饰系统的种类 1.?I型：由三个基因构成，hsdR；hsdM；hsdS（host specificity for DNA restriction modification and specificity）位于染色体上，三个基因构成一个复合体，限制酶需要ATP、Mg2+、SAM（５—腺苷甲硫氨酸），无特异切割位点。 2.?II型：限制与修饰基因产物独立起作用，在Ｅ. coli中这两种基因位于质粒上。 3.?III型：修饰酶与Ｉ型酶相同，hsdＭ与hsdＳ基因产物结合成一亚单位，限制酶是独立存在的。 上述三个系统中，只有II型限制酶与甲基化酶具有相当高的核苷酸识别特异性，因而被广泛用于基